非酒精性脂肪肝和藥物對(duì)小鼠CYP2A5表達(dá)的影響.pdf

1、近年來(lái)，由于脂肪、高糖、激素類(lèi)食品等攝入增加，使人類(lèi)非酒精性脂肪肝（Non-alcoholicfattyliverdisease，NAFLD）發(fā)病率逐年增高，發(fā)病呈低齡化，并成為引發(fā)肝硬化、肝癌的重要病因；NAFLD也是動(dòng)物原發(fā)或繼發(fā)性疾病，不僅給養(yǎng)殖業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，而且隨著病畜進(jìn)入食品，加工品等流通市場(chǎng)，通過(guò)生物鏈又將直接或間接對(duì)人類(lèi)造成危害。NAFLD已成為全球共同關(guān)注的社會(huì)健康和食品安全問(wèn)題。目前國(guó)內(nèi)外用于防治NAFLD的

2、有效藥物較少。
　　 以往對(duì)于NAFLD研究成果發(fā)現(xiàn)NAFLD的發(fā)生發(fā)展與細(xì)胞色素P450（CytochromeP450，CYP450）之間存在著一定的聯(lián)系。CYP450是生物體內(nèi)主要的Ⅰ相代謝酶，包含許多同工酶，鼠類(lèi)細(xì)胞色素P4502A5（CYP2A5）是CYP450中一個(gè)重要的成員，其活性受到眾多因素的影響，在疾病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中不同于其他CYP450酶而呈現(xiàn)獨(dú)特的增量調(diào)節(jié)作用。同時(shí)CYP2A5與人類(lèi)的CYP2A6是起源相同

3、的代謝酶，各自在不同的物種中擔(dān)任著相似的功能，在外源性藥物和結(jié)構(gòu)不同的前致癌物激活以及疾病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中均發(fā)揮了重要的作用。鼠類(lèi)CYP2A5非常適合作為人類(lèi)CYP2A6的模型。食物、環(huán)境或疾病等均會(huì)影響CYP2A5/CYP2A6的表達(dá)。因此通過(guò)對(duì)CYP2A5的研究可以進(jìn)一步了解NAFLD發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制，以及在NAFLD情況下各種藥理通路以及作用靶位，為開(kāi)發(fā)和研制防治NAFLD的新型獸藥提供科學(xué)的理論依據(jù)，同時(shí)對(duì)于預(yù)防人類(lèi)肝臟相關(guān)性

4、疾病和癌癥，指導(dǎo)人類(lèi)臨床合理用藥意義重大。目前，關(guān)于非酒精性脂肪肝對(duì)CYP2A5表達(dá)的影響，以及非酒精性脂肪肝與藥物對(duì)CYP2A5是否有協(xié)同作用等均未見(jiàn)報(bào)道。
　　 本課題將以人工誘發(fā)NAFLD模型的C57BL/6小鼠為試驗(yàn)動(dòng)物，從蛋白、酶活性和mRNA水平研究NAFLD對(duì)CYP2A5表達(dá)的影響，并且探討NAFLD與吡唑、苯巴比妥鈉兩種CYP2A5特殊誘導(dǎo)劑共同作用引起的CYP2A5的變化，旨在揭示CYP2A5在NAFLD造成的

5、肝損傷及其與吡唑、苯巴比妥鈉共同作用時(shí)，其基因表達(dá)的情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：
　　 1.毗唑、苯巴比妥鈉誘導(dǎo)下，C57BL/6小鼠肝臟CYP2A5蛋白水平，酶活性和CYP2A5mRNA均較對(duì)照組增加，差異極顯著（P<0.01），說(shuō)明藥物增加CYP2A5表達(dá)。
　　 2.NAFLD情況下，C57BL/6小鼠肝臟CYP2A5蛋白水平，酶活性和CYP2A5mRNA均較對(duì)照組增加，說(shuō)明CYP2A5在NAFLD狀態(tài)下呈增量調(diào)節(jié)，參與NAF

6、LD的發(fā)生發(fā)展。
　　 3.NAFLD聯(lián)合吡唑、苯巴比妥鈉誘導(dǎo)，C57BL/6小鼠肝臟CYP2A5蛋白水平，酶活性和CYP2A5mRNA均較對(duì)照組極顯著增加（P<0.01），較NAFLD單純誘導(dǎo)和藥物單純誘導(dǎo)增加，且差異極顯著（P<0.01），說(shuō)明二者有協(xié)同作用。
　　 本試驗(yàn)初步發(fā)現(xiàn)NAFLD對(duì)C57BL/6小鼠肝臟CYP2A5呈現(xiàn)增量調(diào)節(jié)機(jī)制，同時(shí)與吡唑和苯巴比妥鈉協(xié)同性增加CYP2A5的表達(dá)，這一發(fā)現(xiàn)將為繼續(xù)研究C