紅褐色烏蘇里貉Agouti基因與KITLG基因的克隆及表達(dá)水平研究.pdf

1、為了探討紅褐色烏蘇里貉和野生型烏蘇里貉Agouti基因和KITLG基因的CDS序列以及其在兩種毛色貉中的表達(dá)水平，本研究以青島萊西萬盛農(nóng)業(yè)有限公司的野生型烏蘇里貉和紅褐色烏蘇里貉為研究對(duì)象，利用克隆測(cè)序技術(shù)，成功克隆了兩種毛色貉Agouti基因和KITLG基因的CDS序列，并對(duì)所得序列進(jìn)行了比對(duì)分析及與其他物種的同源性比較。利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)對(duì)Agouti基因和KITLG基因和在紅褐色烏蘇里貉與野生型烏蘇里貉中的mRNA表達(dá)水平

2、差異進(jìn)行了探究。通過上述研究以期為Agout基因和KITLG基因的功能分析及紅褐色烏蘇里貉毛色突變分子遺傳機(jī)制的研究提供一定的理論基礎(chǔ)。
　　試驗(yàn)成功克隆了野生型烏蘇里貉和紅褐色烏蘇里貉 Agouti基因全長(zhǎng)為396 bp的CDS序列和KITLG基因全長(zhǎng)為825 bp CDS序列，并發(fā)現(xiàn)兩種貉KITLG基因741 bp的轉(zhuǎn)錄本。利用 DNAMAN軟件進(jìn)行比對(duì)分析，結(jié)果顯示一只紅褐色烏蘇里貉 Agouti基因編碼序列的在130 bp

3、堿基由G突變?yōu)門，而兩種毛色貉KITLG基因序列完全匹配。將兩種基因的CDS序列與其他物種進(jìn)行同源性比較分析，發(fā)現(xiàn)紅褐色烏蘇里貉Agouti基因與狗、貓、豬、小鼠、黑猩猩、牛、綿羊、馬、虎鯨以及人等物種的同源性均在80.60％以上，KITLG基因與上述物種的同源性均在80.85%以上，兩者均具有高度的保守性。對(duì)熒光定量數(shù)據(jù)結(jié)果進(jìn)行分析，利用SPSS軟件進(jìn)行獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)，結(jié)果表明Agouti基因與KITLG基因在兩種毛色的貉皮膚組織中均