FKN與百草枯中毒肺損傷的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：
　　百草枯(paraquat，PQ)是全世界較為普遍使用的接觸性脫葉劑及除草劑，屬有機(jī)雜環(huán)類，毒性較強(qiáng)，人畜均可中毒，預(yù)后差，治療困難。PQ吸收后主要蓄積在肺內(nèi)，且不易清除，呼吸系統(tǒng)出現(xiàn)的癥狀在中毒后最為明顯，中毒的主要死因是急性肺泡炎和急進(jìn)性肺間質(zhì)纖維化。百草枯中毒肺損傷的發(fā)病機(jī)制尚不完全清楚。目前認(rèn)為在PQ中毒的發(fā)病過程中，炎癥反應(yīng)占有重要地位，有關(guān)PQ中毒的相關(guān)研究已逐漸傾向于對“炎性細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)失控”的關(guān)注。

2、>　　不規(guī)則趨化因子FKN（fractalkine，又稱CX3CL1），是炎性因子網(wǎng)絡(luò)的成員之一，屬趨化因子CX3C亞族，具有促進(jìn)白細(xì)胞的黏附、轉(zhuǎn)運(yùn)，影響活性氧簇，加快炎性因子的滲出等多種生物學(xué)作用，與疾病的發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切，但FKN與百草枯中毒肺損傷的相關(guān)性研究，在國內(nèi)外的文獻(xiàn)中罕見報(bào)道。本研究的目的旨在探討FKN在百草枯中毒致大鼠肺損傷早期的分布及表達(dá)規(guī)律，以說明FKN在PQ中毒致急性肺損傷過程中的作用。
　　方法：
　

3、　SPF級健康成年雄性SD大白鼠66只，隨機(jī)分成染毒組（36只）和對照組(30只)。染毒組以百草枯22mg/kg腹腔注射染毒，對照組給予等量的生理鹽水。每組按觀察時間點(diǎn)(染毒后6h、12h、24h、72h、120h)隨機(jī)分為5個亞組，染毒72h組8只大鼠，染毒120h組10只，其它亞組各6只。至觀察終點(diǎn)，剔除5只死亡的大鼠及1只因在麻醉及取材過程中不順利的大鼠，各亞組均保留6只入組觀察。取材后，HE染色觀察肺組織病理學(xué)變化并進(jìn)行肺損傷病

4、理評分，測定肺臟系數(shù)，ELISA法測定血清及肺組織勻漿FKN含量，免疫組織化學(xué)染色觀察FKN及NF-κBp65在肺組織中的表達(dá)。應(yīng)用SPSS19.0軟件處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，Excel2007繪制統(tǒng)計(jì)圖。
　　結(jié)果：
　　1、肺組織HE染色:
　　病理變化:染毒組大鼠6h即出現(xiàn)炎性細(xì)胞浸潤，程度較輕，肺泡結(jié)構(gòu)清晰，無明顯充血水腫，隨著染毒時間的延長，病情進(jìn)行性加重，至120h已表現(xiàn)為大量炎細(xì)胞浸潤，肺泡結(jié)構(gòu)破壞，組織充血水腫。

5、對照組大鼠各觀察時間點(diǎn)間無明顯變化，肺組織結(jié)構(gòu)清晰，無炎性細(xì)胞浸潤等肺損傷表現(xiàn)。肺損傷病理評分:染毒組大鼠各觀察時間點(diǎn)的肺損傷病理評分呈逐漸增高趨勢，明顯高于對照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　2、肺臟系數(shù):
　　染毒組大鼠各觀察時間點(diǎn)的肺臟系數(shù)呈逐漸增高趨勢，明顯高于對照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　3、血清及肺組織勻漿FKN含量:
　　染毒組大鼠各觀察時間點(diǎn)血清及肺組織勻漿中FKN含量呈逐漸增高趨勢，明顯高于對

6、照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　4、肺組織FKN及NF-κBp65免疫組化表達(dá):
　　FKN主要表達(dá)在支氣管和肺泡上皮細(xì)胞、肺小動脈內(nèi)皮細(xì)胞中，NF-κBp65主要表達(dá)在支氣管和肺泡上皮細(xì)胞及肺泡巨噬細(xì)胞中，二者在對照組中僅少量表達(dá)，染毒組中表達(dá)量增多。在染毒組中，二者的平均光密度值(MOD)在各觀察時間點(diǎn)呈逐漸增高趨勢，明顯高于對照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　5、相關(guān)性分析:
　　肺臟系數(shù)與肺損傷病理評分之間