不同劑量百草枯中毒致小鼠肝、肺、腎損傷特點(diǎn)研究.pdf

1、目的：百草枯(paraquat，PQ)，是目前世界范圍內(nèi)使用最廣泛的除草劑。近年來(lái)，我國(guó)應(yīng)用PQ日漸增多，中毒的報(bào)道呈不斷上升趨勢(shì)。雖然PQ對(duì)除草非常有效，但它對(duì)人和動(dòng)物的毒性很高。且目前對(duì)其發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，有效的治療措施不多，更無(wú)特效解毒劑。臨床觀察所見(jiàn)，較大劑量中毒患者常由于心、肝、腎、肺等多臟器功能衰竭迅速致死，而較小劑量的中毒活存者往往引起遲發(fā)性肺纖維化，病程相對(duì)較長(zhǎng)。查閱國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)，目前尚無(wú)較為全面探索不同劑量PQ中毒與

2、重要臟器損傷之間關(guān)系的實(shí)驗(yàn)，為此我們?cè)O(shè)計(jì)了從病理學(xué)改變、酶學(xué)指標(biāo)、血生化檢驗(yàn)等方面來(lái)對(duì)PQ中毒引起的重要器官損傷特點(diǎn)進(jìn)行較系統(tǒng)研究的試驗(yàn)，以便尋求針對(duì)性較強(qiáng)的有效治療藥物。 方法：本實(shí)驗(yàn)主要通過(guò)建立動(dòng)物模型來(lái)進(jìn)行研究。首先用無(wú)菌生理鹽水將20％的PQ溶液配置成濃度為5mg/ml的溶液。選取成年雄性昆明小鼠112只，體重25±5g，隨機(jī)分為4組(每組28只)：①正常對(duì)照組(腹腔注射生理鹽水75mg/kg)，②百草枯注射液小劑量組(

3、腹腔注射百草枯50mg/kg)，③百草枯注射液中劑量組(腹腔注射百草枯75mg/kg)，④百草枯注射液大劑量組(腹腔注射百草枯100mg/kg)。各組動(dòng)物分別于中毒后6h、1d、3d、7d、14d、28d分批進(jìn)行抽血檢驗(yàn)，包括肝功能(ALT、AST)，腎功能(BUN、Cr)，隨后處死動(dòng)物，每次每組活殺4只。處死動(dòng)物后解剖，剪取右肺及部分肝組織在液氮中速凍，然后置于-85℃保存，以便利用試劑盒檢測(cè)組織勻漿中超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙

4、二醛(MDA)含量；選取肝臟、腎臟、左肺，常規(guī)HE染色，進(jìn)行病理組織學(xué)觀察；對(duì)小劑量染毒組肺臟除進(jìn)行常規(guī)HE染色外，并進(jìn)行膠原、彈力纖維二聯(lián)染色；所有檢測(cè)結(jié)果均分別與對(duì)照組進(jìn)行對(duì)比分析，并進(jìn)行多樣本均數(shù)的方差分析。 結(jié)果： 1．小劑量染毒組染毒后出現(xiàn)食欲減退、體重稍減輕、呼吸急促等表現(xiàn)，但于7d左右開(kāi)始恢復(fù)。中及大劑量染毒組小鼠染毒后有明顯呼吸系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、消化系統(tǒng)等損傷，并且體重下降，小鼠于3-7d死亡較多。

5、 2．病理組織學(xué)觀察，小劑量染毒組小鼠肝及腎組織損害均較中大劑量染毒組輕微，中大劑量染毒組早期即出現(xiàn)肝細(xì)胞壞死及腎小管大量蛋白管型；肺組織在小劑量染毒組主要表現(xiàn)為引起后期肺纖維化，而中大劑量染毒組則早期即可見(jiàn)到肺出血水腫且小鼠多在早期即死于多器官功能衰竭。 3．小劑量染毒組肝組織勻漿中SOD活力及MDA含量無(wú)明顯變化(P>0.05)，而中大劑量染毒組大部分時(shí)間點(diǎn)，變化均顯著(P<0.05或P<0.01)。各組肺組織勻漿中兩項(xiàng)指標(biāo)

6、的監(jiān)測(cè)，各時(shí)間點(diǎn)均較對(duì)照組明顯改變(P<0.05或P<0.01)，且相同時(shí)間點(diǎn)，染毒劑量越大，變化越明顯。 4．小劑量染毒組血清中ALT、AST、BUN、Cr值后期增加較明顯(P<0.05)，而早期除BUN在3d有所增加(P<0.05)，其余時(shí)間點(diǎn)均無(wú)明顯變化(P>0.05)。而中劑量組除6h時(shí)轉(zhuǎn)氨酶無(wú)明顯升高(P>0.05)，其余時(shí)間點(diǎn)各項(xiàng)指標(biāo)升高均顯著(P<0.05或P<0.01)。大劑量染毒組各時(shí)間點(diǎn)小鼠血清中ALT、AS

7、T、BUN、Cr均有明顯升高(P<0.05或P<0.01)。 結(jié)論：根據(jù)本實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以認(rèn)為： 1．小劑量染毒組肝、腎組織病理?yè)p害較輕，以循環(huán)障礙為主伴細(xì)胞輕微腫脹，表現(xiàn)為小動(dòng)靜脈及毛細(xì)血管內(nèi)淤血、血流緩慢及肝雙核細(xì)胞增多、腎小管上皮腫脹。而肺組織除有淤血外，其主要改變是引起肺纖維化，主要表現(xiàn)在后期肺纖維組織增生，局部出現(xiàn)纖維化傾向。中及大劑量染毒組小鼠早期即出現(xiàn)肝細(xì)胞水樣變性，點(diǎn)狀壞死，肺出血、水腫以及腎小管內(nèi)可見(jiàn)較多的

8、蛋白、上皮管型。 2．小劑量染毒組肝組織勻漿中SOD活力降低及MDA含量增加均不明顯，表明其過(guò)氧化損傷較輕，而肺組織SOD活力降低及MDA含量增加明顯，其脂質(zhì)過(guò)氧化損害重。中及大劑量染毒組肝及肺組織SOD活力降低及MDA含量增加均有明顯改變，脂質(zhì)過(guò)氧化損傷嚴(yán)重。 3．小劑量染毒組血清中ALT、AST值前期無(wú)顯著變化，后期有所升高，BUN值在染毒后第三天有明顯升高，Cr在28d時(shí)有所升高，表明在小劑量染毒組伴隨著肺組織功能