糖尿病足感染與自噬相互作用的初步研究.pdf

1、目的：⑴分析糖尿病足感染（Diabetic foot infection，DFI）與非糖尿病但合并足感染患者的臨床特點。⑵通過與非糖尿病足感染患者創(chuàng)面肉芽組織中細胞的自噬相關蛋白表達情況進行比較，探討糖尿?。―iabetes mellitus，DM）對肉芽組織總的細胞自噬及巨噬細胞自噬水平的影響；合并銅綠假單胞菌感染時，對兩組患者的自噬表達有無影響；并且研究缺血對糖尿病足感染患者細胞自噬的影響。
　　方法：①收集2014年6月-2

2、015年11月于天津醫(yī)科大學代謝病醫(yī)院糖尿病足科住院治療的90例糖尿病足感染患者（糖尿病組）及天津市武警醫(yī)院創(chuàng)傷科住院治療的51例非糖尿病足感染患者（對照組）的臨床資料，分析其一般臨床特點；根據(jù)細菌培養(yǎng)結果及藥敏結果，分析兩組感染細菌的分布特點，比較銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa，PA）的檢出率及耐藥情況，以及多重耐藥銅綠假單胞菌（Multi-drug resistant pseudomonas aerugi

3、nosa，MDRPA）的檢出率。②兩組患者足感染創(chuàng)面清創(chuàng)后深部組織取材，將取得的肉芽組織制作石蠟切片，首先進行HE染色觀察比較兩組患者肉芽組織病理學的變化；其次，將兩組患者的組織切片進行免疫組織化學染色，半定量檢測兩組患者肉芽組織內(nèi)細胞自噬標志性蛋白LC3-Ⅱ（Microtubule-associated protein1 light chain3-Ⅱ）及自噬正調(diào)節(jié)蛋白Beclin-1的表達，比較兩組患者肉芽組織中總自噬體的形成情況、兩

4、組患者PA感染后細胞自噬的形成情況及缺血對糖尿病足感染患者細胞自噬的影響；最后，將兩組患者的組織切片行巨噬細胞標記物CD14及自噬體標志蛋白LC3-Ⅱ的免疫熒光雙染色，定性檢測兩組患者肉芽組織中巨噬細胞的自噬體水平。
　　結果：⑴兩組患者臨床資料比較，在一般資料方面：兩組患者年齡、性別、潰瘍面積、體重指數(shù)、高血壓、冠心病、腦血管病、脂質(zhì)代謝紊亂方面均無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）；但糖尿病組患者糖化血紅蛋白值明顯高于對照組（P＜0.

5、05）。在炎癥指標方面：兩組患者的中性粒細胞百分比及血沉值無明顯的統(tǒng)計學差異（P＞0.05），但是與對照組相比，糖尿病組患者白細胞計數(shù)明顯降低（P＜0.05），而C反應蛋白明顯升高（P＜0.05）。糖尿病組患者共檢出105株病原體，對照組共檢出病原體71株，均以革蘭氏陽性菌感染為主（糖尿病組59.0％，對照組57.7%），且兩組患者感染革蘭氏陽性菌及革蘭氏陰性菌的分布無統(tǒng)計學差異（P＞0.05），兩組患者感染的革蘭氏陽性菌均以金黃色葡萄

6、球菌為主，革蘭氏陰性菌均以銅綠假單胞菌為主，感染細菌的種類無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）。與對照組相比，DM組患者PA檢出率無差異，但有升高趨勢，PA耐藥率及MDRPA檢出率明顯升高；⑵與對照組相比，糖尿病組患者肉芽組織內(nèi)新生的毛細血管數(shù)目及浸潤的炎癥細胞較少；LC3-Ⅱ及Beclin-1蛋白陽性著色細胞數(shù)量較少，顏色較淺；與對照組PA感染患者相比，糖尿病組PA感染患者肉芽組織中LC3-Ⅱ及Beclin-1的表達明顯減弱；與糖尿病非缺血組

7、患者相比，糖尿病缺血組患者創(chuàng)面肉芽組織LC3-Ⅱ及Beclin-1表達降低；與對照組相比，糖尿病組患者肉芽組織中巨噬細胞內(nèi)自噬體標志物LC3-Ⅱ的表達明顯比對照組降低。
　　結論：糖尿病足感染患者多重耐藥銅綠假單胞菌的檢出率及銅綠假單胞菌的耐藥率較高；糖尿病足感染患者創(chuàng)面肉芽組織毛細血管內(nèi)皮細胞、成纖維細胞及炎癥細胞均可發(fā)生自噬，但自噬水平尤其是巨噬細胞的自噬水平降低；合并銅綠假單胞菌感染時，糖尿病足感染患者創(chuàng)面肉芽組織內(nèi)細胞自噬