老年食蟹猴Ⅱ型糖尿病模型阿爾茨海默病相關(guān)核心生物標(biāo)記物的變化及其相關(guān)關(guān)系的研究.pdf

1、目的：
　　本課題擬通過對(duì)靈長類老年食蟹猴探討Ⅱ型糖尿病(Diabetes mellitustype2，T2DM)對(duì)阿爾茨海默病(Alzheimer's Disease，AD)發(fā)病發(fā)展的影響，運(yùn)用ELISA、免疫組織化學(xué)方法來檢測(cè)老年食蟹猴血漿、腦脊液(Cerebrospinal fluid，CSF)及腦組織中AD核心生物標(biāo)記物的改變。
　　方法：
　　1.應(yīng)用血生化分析對(duì)老年食蟹猴根據(jù)空腹血糖(FPG≥7.0 mmo

2、l/L)檢測(cè)，進(jìn)行動(dòng)物篩選，并檢測(cè)血糖類[糖化血紅蛋白(glycosylated hemoglobin，HbA1c)、糖化血清蛋白(Glycosylated serum protein，GSP)]和血脂類[總膽固醇(Total cholesterol，TC)、高密度脂蛋白膽固醇(High-density lipoproteincholesterol，HDL-c)、甘油三酯(Triglycerides，TG)、低密度脂蛋白膽固醇(Low-

3、density lipoprotein cholesterol，LDL-c)]。
　　2.應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)技術(shù)對(duì)自發(fā)性T2DM老年食蟹猴和正常老年食蟹猴血漿中T2DM相關(guān)生物標(biāo)記物(C-肽、INS、IRG)及AD相關(guān)核心生物標(biāo)記物(Aβ42、Aβ40、tau、p-tau)進(jìn)行定量分析，并分析其相關(guān)關(guān)系。
　　3.采用ELISA檢測(cè)技術(shù)對(duì)自發(fā)性T2DM老年食蟹猴和正常老年食蟹猴CSF中AD相關(guān)核心生物標(biāo)記物(

4、Aβ42、Aβ40、tau、p-tau)進(jìn)行定量分析。
　　4.經(jīng)尸解獲取腦組織，利用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)AD相關(guān)核心生物標(biāo)記物的表達(dá)。
　　5.最后，通過ELISA檢測(cè)血漿、CSF中其他AD相關(guān)生物標(biāo)記物(p-tau199、p-tau231、p-tau396)的表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　根據(jù)FPG水平即FPG≥7.0 mmol/L診斷為T2DM，F(xiàn)PG＜5.6 mmol/L為正常，經(jīng)血生化分析結(jié)果篩選老年食蟹猴

5、（年齡＞18歲）為自發(fā)性T2DM食蟹猴（DM組）和正常食蟹猴(NC組)作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象。檢測(cè)DM組血漿中AD相關(guān)核心生物標(biāo)記物水平低于NC組，Aβ42、tau、p-tau與正常組相比具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，且隨FPG水平升高而降低，而Aβ40并無此變化。DM組血漿中T2DM相關(guān)生物標(biāo)記物(C-肽、INS、IRG)水平均比NC組較高，但差異并無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而DM組CSF中C-肽水平明顯比NC組高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。DM組血漿中C-肽、INS與t

6、au均呈線性關(guān)系，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而正常組并無此現(xiàn)象。
　　根據(jù)2016年ADA的診斷標(biāo)準(zhǔn)[11]，即FPG≥7.0 mmol/L，HbA1c≥6.5％診斷為T2DM，F(xiàn)PG＜5.6 mmol/L，HbA1c＜5.6％為正常，篩選出符合ADA標(biāo)準(zhǔn)的T2DM猴（DM+組）和正常猴（NC+組）。DM+組CSF中AD相關(guān)核心生物標(biāo)記物水平低于正常(NC+)組，Aβ40、Aβ42的減低具有顯著差異。組織病理學(xué)觀察到DM+組顳葉皮層Aβ沉積

7、與NC+組相似，而DM+組p-tau則顯示在胞漿中明顯增多，相反，NC+組中并無明顯變化。AD其他相關(guān)生物標(biāo)記物(p-tau199、p-tau231、p-tau396)在CSF的表達(dá)水平顯著高于血漿，尤其血漿中p-tau231、p-tau396未測(cè)出，可見血漿中AD的其他生物標(biāo)記物水平較低。血漿中DM組與NC組AD相關(guān)生物標(biāo)記物水平相差不大，CSF中DM組比NC組AD相關(guān)生物標(biāo)記物水平較高，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論：