色譜--質(zhì)譜聯(lián)用新方法及在高級烷醇分析中的應(yīng)用研究.pdf

1、高級烷醇(policosanol，PC)是煙草中最主要的直鏈醇。大量研究發(fā)現(xiàn)，PC具有抑制前列腺腫瘤、增強神經(jīng)因子、抗膽固醇、神經(jīng)保護(hù)和神經(jīng)營養(yǎng)、抗疲勞、降血脂和促進(jìn)植物生長的功能。PC是卷煙煙氣致癌物質(zhì)多環(huán)芳烴(PAHs)的前體物之一，對人體健康有著重要的的影響。
　　目前國內(nèi)外對PC的分析主要集中在蜂蠟、米糠、及植物油等樣品的測定，而對煙草中的PC的檢測，特別是關(guān)于同時測定多種PC的報道較少。氣相色譜法(GC)或氣相色譜-質(zhì)譜

2、法(GC-MS)是檢測煙草中PC最常用的方法。近年來，液相色譜法(HPLC)、特別是高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(HPLC-MS/MS)因具有靈敏度高，重復(fù)性好，適用范圍廣等優(yōu)點，在實際樣品分析中得到了廣泛應(yīng)用。本論文分別利用GC-MS、HPLC-MS/MS以及聚合物整體柱氣相色譜研究并建立了煙草中PC快速檢測方法，以滿足PC檢測要求。論文包含以下部分:
　　1.建立了液-液萃取-GC-MS-內(nèi)標(biāo)法同時測定烤煙中4種PC的方法。采用5

3、a-膽甾烷作為內(nèi)標(biāo)進(jìn)行校正，同時比較了不同萃取溶劑的萃取效率，對色譜柱的選擇進(jìn)行研究，并對儀器的分析條件進(jìn)行了優(yōu)化，最終建立起烤煙中4種PC的快速檢測方法。在選擇離子監(jiān)測方式(SIM)模式下進(jìn)行質(zhì)譜分析，內(nèi)標(biāo)法定量。結(jié)果表明，4種PC的平均加標(biāo)回收率為92.4％～103.3％，日內(nèi)和日間RSD分別為0.78％～3.47％(n=6)和1.75％～5.76％(n=6)，方法檢出限(LOD，S/N=3)為0.08～0.14μg/mL。本方法簡

4、便、穩(wěn)定性好、重現(xiàn)性好，適用于烤煙中4種PC的同時檢測。
　　2.建立了柱前衍生高效液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜測定煙草中PC的分析方法，樣品經(jīng)皂化、正己烷提取后，以聯(lián)苯酸酐為衍生試劑，在吡啶的催化作用下，60℃衍生反應(yīng)80 min得到穩(wěn)定的衍生產(chǎn)物。系統(tǒng)研究了衍生劑量、衍生溫度等條件對衍生效率的影響。針對目標(biāo)物化學(xué)性質(zhì)和樣品雜質(zhì)情況，對萃取劑種類、色譜條件、質(zhì)譜條件等參數(shù)進(jìn)行了優(yōu)化。在負(fù)離子模式下，采用電噴霧電離源(ESI)和多反應(yīng)

5、監(jiān)測(MRM)監(jiān)測掃描方式，內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行定量分析。結(jié)果表明方法檢出限為0.3～0.4ng/mL，定量限為1.1～1.4 ng/mL，加標(biāo)回收率為88.7％～102.1％，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.7％～5.5％，與以往報道的柱前衍生氣相色譜-質(zhì)譜法相比，本方法具有靈敏度高和基質(zhì)效應(yīng)低的特點。
　　3.以二乙烯基苯(DVB)為功能單體、偶氮二異丁腈(AIBN)為引發(fā)劑、甲苯和十二醇為二元致孔劑，將磁性Fe3O4/SiO2納米粒子均勻分散在該二

6、元致孔劑中，制備了磁性納米粒子修飾的聚合物整體柱。實驗優(yōu)化了致孔劑的配比及摻雜Fe3O4/SiO2納米粒子的濃度。實驗分別采用掃描電子顯微鏡(SEM)、紅外光譜(FT-IR)、氮吸附和熱失重分析(TGA)等技術(shù)對制備的整體柱進(jìn)行表征。并且研究了該整體柱的性能，考察了聚合物材料的穩(wěn)定性，結(jié)果表明，該整體柱具有較好的機械耐久性。將該整體柱用于評估氣相色譜分離性能。同時，我們利用高頻電磁感應(yīng)加熱(EMIH)技術(shù)加熱整體柱，實現(xiàn)了溫度的可控性和

7、均勻性。該整體柱對苯和甲苯具有很好的分離效率，并且獲得了較高的柱效，分別達(dá)到4481和9216塔板/米。另外，該系統(tǒng)的柱容量和進(jìn)樣量高達(dá)5μL和100ng。結(jié)果表明所制備的整體柱是非常有希望用于GC分離的。
　　4.將上述制備的Fe3O4/SiO2納米粒子修飾的聚二乙烯基苯整體柱作為分離介質(zhì)，與氣相色譜-氫火焰離子化檢測器(GC-FID)聯(lián)用，用于檢測烤煙中的PC。采用SEM和氮吸附等表征技術(shù)分析修飾后的整體柱。實驗結(jié)果表明，該整