食品中煙堿殘留的色譜質(zhì)譜聯(lián)用分析方法研究.pdf

1、煙堿作為一種生物農(nóng)藥，具有安全、高效和廣譜抗菌的特性。但食品中煙堿的殘留對人體健康將產(chǎn)生嚴(yán)重危害，成年人的致死量是50～70毫克。2008年8月中國輸出歐盟的26批牛肝菌中均查出有尼古丁殘留，以致大量貨品滯留碼頭，出口企業(yè)損失慘重。而目前食品中煙堿的殘留檢測方法還不能滿足出口食品的質(zhì)量要求。因此，深入開展食品中煙堿殘留的檢測方法研究，建立一套符合國際標(biāo)準(zhǔn)的食品中尼古丁殘留的檢測方法十分重要。
　　 本論文首先對尼古丁的提取，濃縮

2、、和凈化條件均進(jìn)行優(yōu)化。對常用的提取溶劑進(jìn)行提取效率比較，結(jié)果表明5% NaOH溶液(W/V)、2%甲酸水溶液(V/V)、水、甲醇、丙酮、2%甲酸的甲醇(V/V)、乙腈、乙酸乙酯等8種常見提取溶劑對提取效率無明顯差異；對濃縮過程中的酸堿性和濃縮條件進(jìn)行比較，結(jié)果顯示濃縮過程需在酸性條件下進(jìn)行，而且使用平行蒸發(fā)儀的效果最佳；使用陽離子交換固相萃取(MCX-SPE)小柱進(jìn)行凈化，對上柱條件、洗脫液體積進(jìn)行優(yōu)化，結(jié)果表明采用2%甲酸水溶液載樣

3、并用10 mL5%的氨化甲醇作為洗脫液洗脫效果最好。
　　 實驗分別采用液相色譜.質(zhì)譜/質(zhì)譜法(HPLC-MS/MS)和氣相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法(GC-MS/MS)對尼古丁的檢測方法開展研究。采用HILIC柱，用乙腈和乙酸胺進(jìn)行梯度洗脫，選擇離子掃描(MRM)模式、163.0>130.1、163.0>117.1離子對進(jìn)行檢測，在優(yōu)化的HPLC-MS/MS條件下，方法的檢出限為：5 ng/mL，線性范圍為：5 ng/mL～1000

4、ng/mL。采用石英毛細(xì)管柱DB-17MS，程序升溫模式，選擇162>84、133>118為檢測離子對，在優(yōu)化的GC-MS/MS條件下，方法的檢出限為：10 ng/mL，線性范圍為10 ng/mL～1000ng/mL。
　　 利用所建立的HPLC-MS/MS法以及GC-MS/MS法分別進(jìn)行實際樣品中尼古丁殘留量的檢測。根據(jù)樣品的基體采用不同的溶劑提取并進(jìn)行相應(yīng)的前處理，用HPLC-MS/MS法的檢測，發(fā)現(xiàn)牛肝菌、羊肚菌、干香菇、

5、茶葉、木耳、蜂蜜的檢出限為為5μg/kg，雞蛋、豬肉的檢出限為2.5μg/kg，而胡蘿卜、甘藍(lán)等新鮮果蔬的檢出限為1μg/kg；方法的回收率范圍70%-110%，變異系數(shù)2.5%-10.2%。當(dāng)采用GC-MS/MS法檢測時，干香菇、茶葉、脫水洋蔥、木耳，蜂蜜、雞蛋、豬肉的檢出限為10μg/kg，胡蘿卜、甘藍(lán)、蕃茄等新鮮果蔬的檢出限為4μg/kg；方法的回收率范圍70%-110%，變異系數(shù)1.13%-12.5%。實驗結(jié)果表明，所建立的兩種