膠質(zhì)瘤中異檸檬酸脫氫酶基因突變與血管內(nèi)皮生長因子相關(guān)性研究.pdf

1、目的:神經(jīng)膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)病率最高的惡性腫瘤，約占顱內(nèi)腫瘤的40％～50％。我國是膠質(zhì)瘤病的高發(fā)國家，每年的發(fā)病人數(shù)和死亡人數(shù)都位居各種惡性腫瘤的前列，由于它呈侵襲性生長，在治療上十分困難嚴(yán)重威脅著我國人民的生命健康。任何一種腫瘤都是由基因突變或染色體結(jié)構(gòu)變異造成的細(xì)胞惡性增殖性疾病，因此腫瘤發(fā)生相關(guān)基因的鑒定及生物學(xué)功能研究理所當(dāng)然的成為該領(lǐng)域的重點(diǎn)之一。
　　Parsons于2008年應(yīng)用先進(jìn)高通量測序技術(shù)對神經(jīng)膠質(zhì)瘤樣

2、本中基因突變情況進(jìn)行了大量篩查。結(jié)果發(fā)現(xiàn):12％的病例樣本中有異檸檬酸脫氫酶1(Isocitratedehydrogenasel，IDHI)基因突變。并有人指出IDH1基因突變后的膠質(zhì)瘤可以通過增加血管內(nèi)皮生長因子(Vascular endothelialgrowthfactor, VEGF)的表達(dá)，增強(qiáng)腫瘤的營養(yǎng)供給，為腫瘤的適應(yīng)性生存、增殖、轉(zhuǎn)移提供便利，但此原理缺少相關(guān)病例數(shù)據(jù)支持。
　　本實(shí)驗(yàn)通過對不同級別、不同病理類型膠

3、質(zhì)瘤和正常腦組織中IDH1突變基因和VEGF蛋白表達(dá)情況的檢測，推斷IDH1基因突變與VEGF表達(dá)上調(diào)有無相關(guān)性，進(jìn)一步研究IDH1基因突變的致瘤機(jī)制，從而為針對膠質(zhì)瘤IDH1基因突變的靶向治療和抗血管治療提供新的思路和理論基礎(chǔ)。
　　方法:
　　收集2013年1月至2014年10月于河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院神經(jīng)外科病區(qū)行手術(shù)切除的人腦膠質(zhì)瘤標(biāo)本共57例。按照WHO2007年中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤分類，Ⅱ級膠質(zhì)瘤18例;Ⅲ級膠質(zhì)瘤19

4、例，Ⅳ級膠質(zhì)瘤20例。按病理類型的組織來源分類:來源于星形細(xì)胞的星形細(xì)胞瘤和間變型星形細(xì)胞瘤共21例;來源于少突膠質(zhì)細(xì)胞的少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤和間變型少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤共16例;膠質(zhì)母細(xì)胞瘤20例。以上標(biāo)本都有完整的病歷資料并且已經(jīng)在本院病理科證實(shí)。另取11例因腦出血或者外傷行顱內(nèi)減壓的正常腦組織標(biāo)本作為對照。膠質(zhì)瘤患者于手術(shù)前均未進(jìn)行放、化療等任何抗腫瘤治療。所有標(biāo)本均在手術(shù)切下腫瘤后立即取材，于10％的福爾馬林內(nèi)固定保存。采用免疫組織化學(xué)法I

5、HC和免疫熒光技術(shù)檢測IDH1、R132H、VEGF在腦膠質(zhì)瘤和正常腦組織中表達(dá)情況。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　結(jié)果:
　　1正常腦組織中均未檢測到IDH1突變基因和VEGF蛋白的表達(dá);
　　2 IDH1基因在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ級膠質(zhì)瘤中的突變率分別是:61.1％、63.2％、10％，各組間比較:Ⅱ級和Ⅲ級膠質(zhì)瘤之間的突變率無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，余各組之間均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;
　　3 VEGF在Ⅱ、Ⅲ和

6、Ⅳ級膠質(zhì)瘤中表達(dá)的陽性率分別是:44.4％、57.9％、85.0％，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;
　　4 IDH1基因突變率在星形細(xì)胞瘤、少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤和膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中的突變率分別是:57.1％、68.8％、10％，在星形細(xì)胞瘤、少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤中的突變率無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，余各組間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;
　　5 VEGF在星形細(xì)胞瘤、少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤和膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中的陽性率分別是:57.1％、43.8％、85％，在星形細(xì)胞瘤、少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤

7、組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，余各組間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;
　　6 VEGF在IDH1突變型和野生型的星形細(xì)胞瘤中陽性率分別是91.67％和11.1％; VEGF在IDH1突變型和野生型的少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤中陽性率分別是63.64％和0％; VEGF在IDH1突變型和野生型的膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中陽性率分別是100％和83.33％。進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，除膠質(zhì)母細(xì)胞瘤組無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，余各組均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;
　　7 VEGF在IDH1突變型和野生型的所有膠質(zhì)瘤中

8、陽性率分別是80％和50％，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，VEGF蛋白表達(dá)陽性率有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，Pearson列聯(lián)系數(shù)C為0.295。
　　結(jié)論:
　　1 IDH1 R132H在不同病理類型的膠質(zhì)瘤中突變率不同，在星形細(xì)胞瘤和少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤中IDH1 R132H突變率較高為65％左右，在初發(fā)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中突變率較低僅為10％左右;
　　2 VEGF在不同病理級別的膠質(zhì)瘤中表達(dá)陽性率有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，在低級別膠質(zhì)瘤中陽性率較低，在高級別膠質(zhì)