樟子松外生菌根異檸檬酸脫氫酶的表達分析及酶學性質(zhì)研究.pdf_第1頁
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1、分類號Q93學校代碼10129UDC579學號2012211004樟子松外生菌根異檸檬酸脫氫酶的表達分析及酶學性質(zhì)研究StudyontheGeneExpressionAnalysisEnzymaticPropertiesofIsocitrateDehydrogenasefromEctomycrhizaofPinussylvestrisvar.mongolicaLitv申請人：王一超學科門類：理學學科專業(yè)：微生物學研究方向：資源與環(huán)境微生

2、物學指導教師：姚慶智副教授論文提交日期：二〇一五年六月StudyontheGeneExpressionAnalysisEnzymaticPropertiesofIsocitrateDehydrogenasefromEctomycrhizaofPinussylvestrisvar.mongolicaLitvAbstractIsocitratedehydrogenase（IDH）isanimptantratelimitingenzymein

3、theTCAcycle.Itisthebestmodeltostudyboththefunctionofproteinsthecatalyticmechanismregulatymechanismofenzyme.TheIDHofmycrhizaltissueroottissuefungusmyceliumwerepurifiedbyphysicalmethods.TherelativeexpressionofIDHwasstudied

4、byrealtimefluescentquantitative.TheexperimentprovidesatheeticalbasisfthestudyontherelationshipbetweenfunctionmetabolismofIDHinectomycrhiza.IDHwerepurifiedbyphysicalmethodstestedbySDSPAGEelectrophesis.SDSPAGEshowedthatpur

5、ifiedIDHgaveasingleb.TheIDHssubunitrelativemolecularmassofIDHfrommycrhizaltissueroottissuefungusmyceliumwereabout46kD.ThekiicstudyshowedthattheKmfNADPofmycrhizaltissueroottissuefungusmyceliumwere10.7μML11.4μML22.1μML.The

6、Kmfisocitrateofmycrhizaltissueroottissuefungusmyceliumwere71.7μML79.3μML87.8μML.TheoptimalpHofmycrhizaltissueroottissuefungusmyceliumwere8.28.07.5.Theoptimaltemperatureswere45C45C42Crespectively.TheactivitiesofthethreeID

7、Hsweredependentonthebindingofdivalentmetalions.ThemaximumactivitiesofIDHswereobservedwiththepresenceofMn2.TheresultsshowedthatrelativeexpressionoftheIDHgeneinmycrhizaltissuewashigherthanthatinroottissue.Basedonthetestres

8、ultswecanconcludethatectomycrhizalfungicangreatlyimprovetheactivitygeneexpressionofIDHofhostplants.Theresultsprovidethebasisfbiochemistrymolecularbiologytofurtherexplanationhowtheectomycrhizaimprovesthegrowthconditionofh

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