2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁
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1、苯乳酸(PLA)是一種新型生物防腐劑，乳酸脫氫酶(LDH)是乳酸菌(LAB)中轉(zhuǎn)化苯丙酮酸(PPA)生成苯乳酸的主要酶。根據(jù)已知的植物乳桿菌WCFS1全基因組序列可知，植物乳桿菌有三個(gè)乳酸脫氫酶基因，分別為ldhL1、ldhL2、ldhD，三個(gè)基因的酶產(chǎn)物分別為：L1-乳酸脫氫酶、L2-乳酸脫氫酶和D-乳酸脫氫酶。
　　 本研究根據(jù)L.plantarum WCFS1的三個(gè)乳酸脫氫酶基因設(shè)計(jì)引物，并以植物乳桿菌SK002全基因組D

2、NA為模版，PCR擴(kuò)增并連接到pMD-19簡(jiǎn)易T載體。測(cè)序結(jié)果表明：植物乳桿菌SK002 ldhL1基因長(zhǎng)度為963 bp； ldhD(Gene bank登錄號(hào)FJ712706)基因長(zhǎng)度為999 bp；ldhL2基因長(zhǎng)度為930 bp。將三個(gè)基因連入表達(dá)載體，并導(dǎo)入大腸桿菌BL21(DE3)中，成功誘導(dǎo)表達(dá)并純化出三種重組乳酸脫氫酶。三種酶的蛋白分子量分別為35、34、40 kDa。測(cè)定三種重組酶對(duì)底物苯丙酮酸的活性，發(fā)現(xiàn):L2-LDH

3、對(duì)苯丙酮酸的比活力僅為0.06U/mg； L1-LDH為71.06 U/mg，是L2-LDH的1000多倍；D-LDH比活力為215.84 U/mg。故重點(diǎn)研究L1-LDH和D-LDH的酶學(xué)性質(zhì)。L1-LDH酶活測(cè)定的最適pH為6.0，溫度為40℃:D-LDH最適pH為6.0，溫度為30℃；L1-LDH的pH穩(wěn)定性及熱穩(wěn)定性均好于D-LDH。在各自的最適測(cè)定酶活條件下，測(cè)定兩種酶對(duì)丙酮酸及苯丙酮酸的Km。L1-LDH對(duì)丙酮酸及苯丙酮酸K

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