天麻靈芝顆粒的研究.pdf

1、目的:對(duì)天麻靈芝顆粒的提取工藝、成型工藝、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、初步穩(wěn)定性、藥效、急性毒性、長(zhǎng)期毒性進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。
　　方法:采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)法，以天麻素含量為指標(biāo)，考察煎煮時(shí)間、加水量對(duì)天麻、靈芝提取效果的影響;采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)法，以出膏率、淫羊藿苷含量為指標(biāo)，考察加水量、提取次數(shù)、提取時(shí)間對(duì)處方中余下藥味制首烏、黃精、淫羊藿提取效果的影響;采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)法，以顆粒的外觀性狀、溶化性、天麻素含量、淫羊藿苷含量為指標(biāo)，考察淀粉、糊精、糖粉用

2、量比例對(duì)成型效果的影響;采用TLC法對(duì)處方中天麻、淫羊藿、靈芝進(jìn)行定性鑒別;采用HPLC法測(cè)定天麻素和淫羊藿苷的含量;采用室溫存放和恒溫恒濕加速試驗(yàn)考察該品的初步穩(wěn)定性，分別考核性狀、鑒別、溶化性、水分、微生物限度、含量測(cè)定等;通過(guò)小鼠斷頭張口喘氣實(shí)驗(yàn)、耐常壓缺氧實(shí)驗(yàn)、豚鼠氯仿所致眩暈實(shí)驗(yàn)、旋轉(zhuǎn)刺激缺血性眩暈?zāi)Ｐ痛笫笏詫m實(shí)驗(yàn)，考察天麻靈芝顆?？寡炞饔?通過(guò)小鼠自主活動(dòng)實(shí)驗(yàn)、小鼠協(xié)同戊巴比妥鈉催眠實(shí)驗(yàn)，考察天麻靈芝顆粒的鎮(zhèn)靜催眠作用;

3、通過(guò)小鼠扭體法實(shí)驗(yàn)、小鼠熱板法實(shí)驗(yàn)，考察天麻靈芝顆粒鎮(zhèn)痛作用;通過(guò)游泳和調(diào)節(jié)免疫實(shí)驗(yàn)，考察天麻靈芝顆?？蛊诩罢{(diào)節(jié)免疫的作用;觀察小鼠在一天內(nèi)2次給予最大濃度、最大容積的天麻靈芝顆粒溶液后，小鼠在14天觀察期內(nèi)出現(xiàn)的急性毒性反應(yīng)情況;觀察大鼠連續(xù)12周、24周灌胃給予天麻靈芝顆粒61.78g（生藥）/kg、30.89g（生藥）/kg、15.44g（生藥）/kg的長(zhǎng)期毒性反應(yīng)情況。
　　結(jié)果:天麻、靈芝的最佳提取工藝為加10倍量水，

4、煎煮2小時(shí)。制首烏、黃精、淫羊藿的最佳提取工藝為煎煮2次，每次煎煮2h，分別加8、6倍量水;最佳基質(zhì)配比為糊精∶糖粉(5∶14)，淀粉用量為0;天麻、靈芝、淫羊藿定性鑒別的薄層色譜上，樣品及對(duì)照品顯相同的斑點(diǎn);含量測(cè)定中，天麻素在0.0502μg～0.3012μg、淫羊藿苷在8.4480μg～84.4800μg與峰面積具有良好的線性關(guān)系;平均回收率分別為99.85％和99.61％，RSD分別為0.33％和1.72％(n=9);穩(wěn)定性結(jié)果

5、顯示本品所測(cè)各項(xiàng)指標(biāo)都在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案所規(guī)定的范圍內(nèi);藥效學(xué)研究中，天麻靈芝顆粒能促進(jìn)大腦供血供氧，能明顯的減少小鼠的自主活動(dòng)次數(shù)，增加閾下劑量戊巴比妥鈉睡眠小鼠只數(shù)，縮短閾劑量戊巴比妥鈉小鼠入睡潛伏期并延長(zhǎng)入睡時(shí)間，能顯著地增加醋酸致小鼠扭體反應(yīng)潛伏期并減少扭體反應(yīng)次數(shù)，增加熱板法小鼠痛閾值，能明顯的延長(zhǎng)小鼠游泳時(shí)間，增加幼齡小鼠脾臟、胸腺指數(shù)，增加小鼠的廓清系數(shù)和吞噬指數(shù);在天麻靈芝顆粒小鼠口服急性毒性試驗(yàn)中，小鼠1日內(nèi)給予最大給藥量

6、332.1g（生藥）/kg體重，相當(dāng)于成人臨床用藥量的322.4倍，未見明顯毒性反應(yīng);在長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)中，除去各組大鼠體重、攝食逐日增加外，未觀察到各組大鼠行為、活動(dòng)、皮毛、大、小便等明顯異常變化，未觀察到各組大鼠血液細(xì)胞學(xué)、血液生化學(xué)指標(biāo)明顯變化，未觀察到各組大鼠主要器官:心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、胸腺、腦組織、子宮、卵巢、睪丸、附睪系數(shù)明顯差異，同時(shí)上述臟器及食管、胃、腸、膀胱、胰腺、視神經(jīng)、腸等臟器病理檢查未見明顯異常反應(yīng)。