天麻藥材質(zhì)量評價(jià)及大鼠口服天麻水提液后天麻素的藥代動力學(xué)研究.pdf

1、天麻系蘭科植物天麻(Gastrodia elata B1.，Tianma)的干燥塊莖，是平肝息風(fēng)止痙的傳統(tǒng)名貴中藥，其藥用歷史達(dá)1000多年?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究證明天麻具有抗驚厥、鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、抗炎、心血管系統(tǒng)等作用，并對腦的學(xué)習(xí)和保護(hù)功能也有不同的作用。目前關(guān)于天麻的開發(fā)利用不僅在藥用方面，而且在保健品、食品方面也得到了發(fā)展。本文在總結(jié)前人研究基礎(chǔ)上，對天麻質(zhì)量評價(jià)及其有效成分天麻素和天麻苷元的藥代動力學(xué)方面進(jìn)行了研究，為天麻科學(xué)的質(zhì)量控制

2、及合理用藥提供依據(jù)。 1.天麻藥材質(zhì)量的評價(jià)本論文采用HPLC-DAD建立天麻藥材指紋圖譜的分析方法，天麻主要成分均得到較好分離，對方法進(jìn)行確證，精密度、重現(xiàn)性及穩(wěn)定性均符合要求，并且應(yīng)用此方法分析了18個(gè)不同產(chǎn)地及每個(gè)產(chǎn)地均有4種不同炮制方法共72個(gè)樣本的天麻藥材。天麻藥材指紋圖譜HPLC-DAD分析條件如下：色譜柱為Zorbax XDB C18色譜柱(250×4.6 mm，5μm)；流動相為乙腈-0.1％醋酸水系統(tǒng)，檢測波長

3、為270 nm；流速為1mL/min；柱溫25℃。天麻藥材HPLC-MS分析條件：HPLC分析條件同指紋圖譜，MS檢測采用ESI電離源，以負(fù)離子模式檢測，離子源噴霧電壓為3.5kV，離子源溫度為335℃，霧化氣壓力和流速分別為8264Pa和9L/min。得到的色譜圖通過“中藥色譜指紋圖譜相似度評價(jià)系統(tǒng)2004A版”(國家藥典委員會編)軟件的處理，得到天麻藥材相似度數(shù)值，確定不同產(chǎn)地天麻藥材有10個(gè)共有峰，并通過LC-MS分析得到的MS數(shù)

4、據(jù)，結(jié)合對照品對照和參考文獻(xiàn)指認(rèn)了8個(gè)共有峰。在不同產(chǎn)地分析中，大多數(shù)產(chǎn)地天麻藥材質(zhì)量的相似度較好，個(gè)別產(chǎn)地如陜西略陽九重金中天麻藥材的質(zhì)量相對較差，相似度結(jié)果較低。從不同炮制方法分析結(jié)果來看，藥材直接凍干的處理方法其藥材質(zhì)量優(yōu)于其他炮制方法，而藥材煮后烘干的炮制方法質(zhì)量最差。同時(shí)建立了天麻藥材代謝指紋圖譜，分析了大鼠口服天麻水提液后不同時(shí)間點(diǎn)的血漿樣品，指認(rèn)了入血的3個(gè)主要成分，其中兩個(gè)分別為天麻素和天麻苷元。另外，建立了快速的HPL

5、C方法對18個(gè)不同產(chǎn)地和4種不同炮制方法的天麻藥材中的主要成分天麻素和天麻苷元進(jìn)行含量測定，天麻藥材含量測定HPLC分析條件如下：流動相為乙腈-0.1％冰醋酸水(4.5：95.5)等度洗脫，其余條件均同天麻藥材指紋圖譜的分析條件。同時(shí)，對該方法進(jìn)行了方法學(xué)確證，分析了不同產(chǎn)地天麻藥材的質(zhì)量和不同炮制方法天麻藥材的優(yōu)劣。指紋圖譜的分析結(jié)果和主要成份含量測定結(jié)果基本一致。 2.大鼠口服天麻水提液后其主要成分天麻素和天麻苷元的藥代動力

6、學(xué)研究應(yīng)用HPLC-MS技術(shù)建立了大鼠口服天麻水提液后血漿中天麻素和天麻苷元濃度的測定方法，并測定了其含量。血樣前處理方法采用簡便的甲醇沉淀蛋白法。并對所建立的兩種有效成分及內(nèi)標(biāo)的含量測定方法進(jìn)行了方法確證。結(jié)果表明方法的精密度，準(zhǔn)確度均符合要求。天麻素和天麻苷元線性范圍分別為2.00～200.00μg/mL和0.832～104.00μg/mL，相關(guān)系數(shù)r>0.9997。日間和日內(nèi)精密度均小于17.82％，天麻素的回收率在78.3～86

7、.88％之間，天麻苷元的回收率在84.2～93.39％之間。所有結(jié)果表明該方法快速、簡便、重現(xiàn)性好能用于大鼠血漿中天麻素和天麻苷元的測定。根據(jù)不同時(shí)間點(diǎn)大鼠血漿中天麻素的濃度建立了大鼠口服天麻水提液后天麻素的藥時(shí)曲線圖。并采用二室模型通過WinNonlin5.0.1藥動學(xué)軟件得到基本藥代動力學(xué)參數(shù)。大鼠口服天麻水提液后15min檢測到天麻素并在給藥后70min時(shí)天麻素血漿濃度達(dá)到峰值。而天麻中另一個(gè)有效成分天麻苷元僅在給藥45、70、1