高肺血流性肺動(dòng)脈高壓大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞鈣激活氯通道的電生理研究.pdf

1、目的：通過(guò)對(duì)大鼠行腹主動(dòng)脈-下腔靜脈分流術(shù)，建立高肺血流致肺動(dòng)脈高壓模型，模擬先天性心臟病左向右分流的高肺血流量的病理狀態(tài)，觀測(cè)肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞(PASMCs)鈣激活氯離子通道(ClCa)的電生理特性，并探討其在高肺血流性肺動(dòng)脈高壓形成過(guò)程中的可能作用。
　　 方法：SD大鼠(雌雄不分)40只，6-7周齡，180-220g，隨機(jī)分為3組：(1)對(duì)照組(A組，n=10)：正常大鼠；(2)假手術(shù)組(B組，n=10)：僅行開(kāi)腹手術(shù)，暴

2、露腹主動(dòng)脈及下腔靜脈，不作分流手術(shù)；(3)模型組(C組,n=20)：行腹主動(dòng)脈-下腔靜脈分流術(shù)，建立左向右分流致肺動(dòng)脈高壓模型。術(shù)后大鼠同條件下飼養(yǎng)11周后，用右心導(dǎo)管法測(cè)定大鼠右心室壓力(RVSP)，并檢測(cè)右心室肥厚指數(shù)(RVHI)；分離肺內(nèi)2-3級(jí)肺動(dòng)脈分支，急性酶分離法(膠原酶Ⅰ型和木瓜蛋白酶)分離出單個(gè)肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞(PASMC)，應(yīng)用膜片鉗全細(xì)胞記錄模式，測(cè)定各組大鼠PASMCs靜息膜電位、鈣激活氯離子通道電流及電流密度的改

3、變，比較各組大鼠Ⅰ-Ⅴ曲線的變化，并進(jìn)行相關(guān)性分析。
　　 結(jié)果：(1)模型組(C組)大鼠的RVSP和RVHI均明顯高于正常對(duì)照組(A組)、假手術(shù)組(B組)，(均P＜0.01)；B組大鼠的RVSP和RVHI與A組比較，差異沒(méi)有顯著性(均P＞0.05)。(2)C組大鼠PASMCs的膜靜息電位高于A、B兩組，差異具有顯著性(均P＜0.05)；B組大鼠PASMCs的膜電位與A組比較，差異無(wú)顯著性(均P＜0.05)。(3)A、B、C三組

4、大鼠PASMCs的外向ClCa電流(Itd，在+80mV電壓刺激時(shí)的峰值)、電流密度分別為：A組381.609±39.898pA、37.864±59.06pA/pF；B組360.475±31.053pA、35.177±3.768pA/pF；C組364.487±38.96pA、35.248±3.003pA/pF，三組間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(4)ClCa的內(nèi)向電流(Itail，在+20mV電壓刺激時(shí)的峰值)、電流密度分別為：C組-605.9

5、12±105.82pA、-58.94±11.14pA/pF；B組：-443.71±28.88pA、-41.363±1.75pA/pF；A組：-480.85±34.82pA、-47.59±5.16pA/pF。C組Itai、電流密度的絕對(duì)值較之A、B組增大，差異有顯著性(均P＜0.05)；B組與A組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(5)A、B、C三組大鼠PASMCs上ClCa外向電流Itd的Ⅰ-Ⅴ曲線無(wú)明顯漂移。(6)模型組(C組)大鼠鈣激活性氯離子

6、通道內(nèi)向電流Itail的Ⅰ-Ⅴ曲線明顯向下移；假手術(shù)組(B組)大鼠的Ⅰ-Ⅴ曲線和正常對(duì)照組(A組)大鼠的Ⅰ-Ⅴ曲線漂移無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(7)靜息膜電位(Em)與RVSP、RVHI呈顯著正相關(guān)關(guān)系；Itail及的電流密度與RVSP、RVHI、靜息膜電位(Em)均呈顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系(P＜0.01)；而Itd及Itd的電流密度與RVSP、RVHI、靜息膜電位(Em)均無(wú)明顯相關(guān)。
　　 結(jié)論：(1)腹主動(dòng)脈-下腔靜脈分流所致高肺血流性肺動(dòng)