衰老對AhR及其血管生成相關因子表達的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  探討芳香烴受體(aryl hydrocarbon receptor,AhR)在過氧化氫(H2O2)誘導的人臍靜脈內(nèi)皮細胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)衰老模型中表達的變化情況及其對血管生成相關因子表達的影響。
  方法:
  將人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVECs)作為正常對照組,實驗組采用不同濃度的H2O2(100μM,200μM,300μM)氧化

2、損傷HUVECs誘導內(nèi)皮細胞衰老制作成衰老內(nèi)皮細胞模型。首先用β-半乳糖苷酶染色觀察細胞藍染情況,通過計算藍染細胞占總細胞數(shù)的百分比確定HUVECs衰老程度。然后采用Western blot方法檢測不同衰老水平HUVECs中AhR蛋白的表達情況以及血管生成相關因子—低氧誘導因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)蛋白表達的變化,采用ELISA方法檢測細胞培養(yǎng)上清液中血管內(nèi)皮生長因子(vascul

3、arendothelial growth factor,VEGF)表達的變化。
  結果:
  與對照組相比,經(jīng)過不同濃度H2O2氧化損傷處理后,人臍靜脈內(nèi)皮細胞均出現(xiàn)內(nèi)皮細胞衰老表現(xiàn)。隨著H2O2處理濃度的增加,AhR蛋白表達顯著增加,而HIF-1α、VEGF蛋白表達明顯減少,均具有統(tǒng)計學差異,其中200μM H2O2損傷模型組和300μM H2O2損傷模型組呈現(xiàn)顯著統(tǒng)計學差異(P<0.001)。且各組均呈現(xiàn)出劑量依賴性,

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