多種營養(yǎng)元素和強化大豆協(xié)同拮抗氟中毒雌鼠性腺軸損傷作用的研究.pdf

1、目的：探討Ca、Mg、Cu、Zn、 vitD和強化大豆干預燃煤型氟中毒對雌鼠性腺軸損傷作用及其可能機制。
　　方法：1.以SD雌鼠為研究對象，采用自由食用織金病區(qū)原煤烘烤的玉米飼料喂養(yǎng)雌鼠以復制燃煤型氟中毒動物模型將其分為四組：對照組、染氟組、單獨干預組、聯(lián)合干預組，對照組給予正常飼料，染氟組給予100mg/kg染氟飼料，單獨干預組在100mg/kg染氟飼料的基礎上加入鈣爾奇牌添佳片，聯(lián)合干預組在100mg/kg染氟飼料的基礎上同

2、時加入鈣爾奇牌添佳片和強化大豆；2.動態(tài)觀察雌鼠染氟期間牙齒的變化情況；3.采用離子選擇電極法、高溫灰化-氟離子選擇電極法測定雌鼠尿氟、骨氟含量；4.于不同時間段（60d、120d、180d）的動情期麻醉后處死雌鼠，采用股動脈取血法收集雌鼠血液，分離血清，電化學發(fā)光放射免疫法檢測卵泡雌激素（FSH）、黃體生成素（LH）、睪酮(T)、雌二醇（E2）、孕酮（P）及用ELISA法檢測促性腺釋放激素（GnRH）、抑制素（INH）的血清含量；5.

3、①分離下丘腦、垂體、卵巢并稱重，計算下丘腦、垂體、卵巢的臟器系數(shù)。②HE染色光鏡下觀察下丘腦、垂體、卵巢組織形態(tài)。③電鏡下觀察卵巢組織超微結(jié)構(gòu)及顆粒細胞凋亡情況。
　　結(jié)果：1.成功復制染氟組和干預組動物模型；2.除對照組外其余組均出現(xiàn)程度不同的氟斑牙，隨時間的延長逐漸加重，氟斑牙情況兩干預組較染氟組輕，聯(lián)合干預組較單獨干預組輕；3.在同一時間點（60d、120d、180d），染氟組雌鼠尿氟、骨氟含量均高于對照組（P＜0.05），

4、染氟組、單獨干預組、聯(lián)合干預組雌鼠的尿氟依次增加（P＜0.05），骨氟依次減低（P＜0.05），隨著時間的延長，染氟組、單獨干預組、聯(lián)合干預組尿氟含量均逐漸增加（P＜0.05），染氟組骨氟含量逐漸增加（P＜0.05）；單獨干預組、聯(lián)合干預組骨氟含量逐漸降低，除單獨干預組60d與120d相比無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）外，其余均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），4.各組間垂體、下丘腦、卵巢臟器系數(shù)均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)；5.在光鏡下，

5、下丘腦和垂體組織未見明顯的組織損傷，僅見輕微的組織水腫和間質(zhì)血管充血；卵巢組織出現(xiàn)明顯的病理損傷，染氟組隨時間延長，卵泡顆粒細胞由輕度、中度、到重度呈現(xiàn)漸進性水腫的變化，細胞結(jié)構(gòu)和細胞輪廓變得模糊，閉鎖的卵泡和黃體退化逐漸增多，成熟卵泡偶見。兩干預組卵泡顆粒細胞少見輕度水腫，細胞結(jié)構(gòu)和細胞輪廓趨于正常，正常的各級卵泡多見，閉鎖的卵泡和退化的黃體明顯低于染氟組6.染氟組卵巢組織超微結(jié)構(gòu)出現(xiàn)顆粒細胞、基質(zhì)細胞凋亡；兩干預組在早期仍可見較明顯

6、的超微結(jié)構(gòu)損害，隨干預時間延長，與染氟組比較，兩干預組雌鼠卵泡顆粒細胞和基質(zhì)細胞超微結(jié)構(gòu)均基本正常，未見凋亡樣改變。添加蛋白質(zhì)后聯(lián)合干預組脂滴明顯少于單獨干預組。7.①同一時間（60d、120d、180d）雌鼠血清GnRH、FSH、LH、T水平染氟組均高于對照組，除60d血清FSH水平染氟組略高于對照組無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）外，其余有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；兩干預組與染氟組相比，60d時雌鼠血清GnRH、FSH、LH、T水平無

7、明顯差異，除LH60d染氟組高于聯(lián)合干預組，有統(tǒng)計學意義外（P＜0.05），其余均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），120d、180d染氟組均高于兩干預組，且兩干預組與染氟組相比均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；兩干預組間比較，除LH聯(lián)合干預組低于單獨干預組有統(tǒng)計學意義外（P＜0.05），其余均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；隨著時間的延長，對照組除血清FSH含量60d與180d相比和血清LH含量60d、120d與180d相比有統(tǒng)計學意義（P＜

8、0.05）外，其余均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；染氟組血清 GnRH、FSH、LH、T水平均逐漸升高，除血清LH含量60d與120d相比和GnRH組內(nèi)兩兩比較無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）外，其余均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；單獨干預組除血清LH含量60d、120d與180d相比有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）外，其余均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；聯(lián)合干預組血清FSH、LH含量60d與180d相比和血清GnRH含量60d、120d與18

9、0d相比有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）外，其余均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）②60d、120d、180d血清P、INH水平染氟組均低于對照組，除染氟組血清P水平60d與對照組比較無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）外，其余均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；染氟組與兩干預組比較，60d時血清P、INH水平染氟組與兩干預相近均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），120d、180d染氟組明顯低于兩干預組，且染氟組與兩干預組相比均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；兩

10、干預間比較，INH聯(lián)合干預組均高于單獨干預組且有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），血清P水平兩干預組結(jié)果相近，均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。隨著時間的延長，血清P水平染氟組逐漸降低，除60d與120d和180d相比有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），其余均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。血清INH含量染氟組逐漸降低，60d、120d與180d相比有統(tǒng)計學意義（P＞0.05），其他三組隨時間的延長逐漸升高，對照組、單獨干預組60d與180d有統(tǒng)計學意

11、義（P＜0.05）。③60d E2的血清水平對照組、染氟組、單獨干預組、聯(lián)合干預組依次升高，除染氟組和單獨干預組比較結(jié)果無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）其余各組兩兩比較差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。120d、180d染氟組結(jié)果均低于其他各組，與染氟組比較除單獨干預組結(jié)果無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），其余均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），聯(lián)合干預組結(jié)果均高于單獨干預組，但均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。隨著時間的推移E2的水平對照組由低到

12、高再到低且60d與120d結(jié)果差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。染氟組E2結(jié)果由高逐漸降低結(jié)果有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。兩干預組E2有逐漸降低的趨勢，且60d與180d比較有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　結(jié)論：1. Ca、Mg、Cu、Zn、 VitD等多種營養(yǎng)元素對氟毒性所致血清卵巢相關激素P、E2、 INH降低和T的增高有明顯的拮抗作用，且隨干預時間延長，其相關激素水平逐漸趨于正常，對下丘腦分泌激素 GnRH和垂體分泌激