轉EPSPS-G6基因棉花種質系雄配子對草甘膦敏感性及其在雜交棉制種中的應用.pdf

1、本研究以轉基因的抗草甘膦棉花種質系為材料，探究轉基因抗草甘膦棉花植株現蕾后噴施不同濃度草甘膦對花器官形態(tài)結構和配子育性的影響。結果表明，草甘膦處理對轉EPSPS-G6基因棉花種質系植株的生長發(fā)育無明顯影響。然而，棉花現蕾以后，草甘膦處理卻能導致轉基因抗草甘膦棉花種質系花冠變小，花絲變短，柱頭變長，花藥皺縮、不能開裂，呈雄性敗育的特征，尤其是高濃度草甘膦處理?；ǚ哿Ｓ澡b定及不同間隔時間噴施草甘膦的試驗結果表明，間隔20 d噴一次草甘膦，

2、即在首次噴藥20 d后保持完全不育?？紤]到氣候等因素，轉基因抗草甘膦棉花可在現蕾初期噴施20 mM的草甘膦，每隔15d（遇特殊氣候可延5d）噴1次，共噴4次，即可進行不去雄雜交棉制種。
　　 通過固體組織材料石蠟切片技術比較20 mM濃度誘導的雄性不育小孢子發(fā)育與對照和質核互作雄性不育系小孢子發(fā)育的差異。發(fā)現質核互作雄性不育系在小孢子母細胞初期開始出現敗育，敗育時間早，小孢子母細胞降解和絨粘層發(fā)育障礙是導致該材料不產生花粉的兩個

3、主要原因;草甘膦誘導的雄性不育小孢子敗育的時間比較晚，表現為小孢子母細胞敗育、出現三分體、四分體畸形、藥室穿孔等現象且不育個體間的表現有一定的差異。
　　 為探究草甘膦誘導該種質系雄性不育的分子機理，采用RT-PCR技術分析了EPSPS-G6基因在20 mM處理第20 d當天葉片、花萼、花冠、雄蕊和雌蕊中的表達情況。結果表明與CK相比，葉片、花萼、花冠中EPSPS-G6基因表達量與CK相近，雄蕊和雌蕊的表達分別增加到1.89和1