上海市耐藥結(jié)核病流行規(guī)律及結(jié)核分枝桿菌embB基因306位點突變與耐藥的相關(guān)性研究.pdf

1、結(jié)核病(TB)仍然是目前全球和我國嚴重的公共衛(wèi)生問題之一。我國有近一半人口(約5.5億人)感染了結(jié)核桿菌,全國現(xiàn)有肺結(jié)核病人451萬,同時每年因結(jié)核病死亡約有13萬人,是各種傳染病和寄生蟲病死亡總和的2倍。耐藥結(jié)核病,尤其是耐多藥(MDR)結(jié)核病和廣泛耐藥(XDR)結(jié)核病的出現(xiàn)更是給全球結(jié)核病控制帶來了嚴重的挑戰(zhàn),已成為結(jié)核病研究和控制領(lǐng)域亟待解決的難點之一。
　　 本研究首先回顧性分析了2000-2006年上海市耐藥監(jiān)測數(shù)據(jù),

2、對結(jié)核病人的耐藥譜、耐藥流行趨勢和特點進行了分析,并探討了耐藥結(jié)核病的危險因素。同時,在流行病學分析的基礎(chǔ)上,利用基因分型技術(shù)深入探討了復(fù)發(fā)患者耐藥產(chǎn)生的原因。此外,本研究對上海市結(jié)核分枝桿菌流行菌株的embB基因306位點突變情況與耐藥表型進行了分析,進一步揭示了結(jié)核分枝桿菌耐藥的分子機制。流行病學資料表明,2000-2006年,上海市有藥物敏感性檢測結(jié)果的8419例肺結(jié)核患者中,耐藥率為16.6％,耐多藥率為4.0％,耐INH率為1

3、0.3％,耐RFP率為5.6％,耐SM率為11.1％,耐EMB率為1.2％。上海市結(jié)核病耐藥率處于全球較高水平,控制形勢仍然嚴峻。2000-2003年,上海市結(jié)核病耐藥率p=0.01)以及耐多藥率(p=0.005)顯著上升。加強結(jié)核病防治措施后,2004-2006年,耐多藥率顯著下降28.8％(p=0.04),耐藥率(p=0.68)保持穩(wěn)定,并呈現(xiàn)下降趨勢,提示結(jié)核病控制措施的完善和加強可有效防止耐藥結(jié)核病的產(chǎn)生和傳播。此外,72％(1

4、016/1401)的耐藥患者和60％(199/333)的耐多藥患者為初治患者,無既往抗結(jié)核治療史報告。提示耐藥菌株的近期傳播可能是耐藥病人產(chǎn)生的主要原因。與耐藥及耐多藥相關(guān)的獨立危險因素包括復(fù)治、流動人口、30-59歲年齡組、居住于市區(qū)。
　　 本研究以1999-2004年上海市復(fù)發(fā)患者為例,利用結(jié)核分枝桿菌基因型分型技術(shù)對耐藥患者前后二次發(fā)病菌株的基因型進行了分析。在18例復(fù)發(fā)耐藥病例中,13例(72.2％)患者兩次發(fā)病菌株的

5、MIRU基因型都發(fā)生了改變,只有5例患者前后兩次發(fā)病菌株的MIRU基因型沒有改變。說明大多數(shù)復(fù)發(fā)耐藥患者并不是由前次發(fā)病的菌株所致,而是感染了其它耐藥菌株所致,屬于原發(fā)性耐藥,這一結(jié)果提示原發(fā)性耐藥在耐藥結(jié)核病產(chǎn)生中起著重要作用,同時提示耐藥結(jié)核分枝桿菌的近期外源性感染較為嚴重。今后要加強傳染源的控制,切斷傳播途徑。乙胺丁醇(EMB)是目前普遍使用的一線抗結(jié)核藥物之一。有研究表明EMB耐藥菌株往往同時耐其它藥物。為了觀察這種現(xiàn)象是否與不

6、同地區(qū)的流行菌株相關(guān),本研究對上海市1999-2005年收集的結(jié)核分枝桿菌的EMB耐藥表型進行分析。結(jié)果表明,在耐EMB的104株結(jié)核分枝桿菌菌株中,單耐EMB的菌株僅占2.9％,97.1％都同時耐其它藥物。而且,耐EMB菌株隨著耐其它藥物種類的增加,菌株數(shù)也逐步增加,提示耐EMB與耐其它藥物存在相關(guān)性。為了進一步探討embB306位點突變和結(jié)核分枝桿菌耐藥之間的相關(guān)性,本研究分析了162株流行菌株的embB306位點突變情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)

7、,54株全敏感菌株沒有embB306位點突變,而在耐任何藥物的菌株中28.7％可檢測到embB306位點突變(p<0.0001)。embB306位點突變不僅可在EMB耐藥菌株中檢測到,也可發(fā)生在EMB敏感菌株中。而且,隨著菌株耐不同藥物數(shù)量的增加,embB306位點突變也隨之增高,表明embB306位點突變與結(jié)核分枝桿菌耐任何藥物存在相關(guān)性。另外,MDR菌株(35.3％)embB306位點的突變率顯著高于非MDR菌株(7.4％,P<0.