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文檔簡介
1、本文首先檢測了CHMO(環(huán)己酮單加氧酶)和PAMO(苯基丙酮單加氧酶)兩種酶對4-甲基環(huán)己酮的氧化作用。原始的PAMO酶無氧化作用。對PAMO基因Gln93Asp/Pro94Asp兩個點突變后,能夠催化4-甲基環(huán)己酮,但是催化活力極低。對4-甲基環(huán)己酮催化活力比較高的CHMO酶進行生物催化研究。通過自誘導的方法極大的提高了CHMO的酶活,提高了26倍左右。
為了解決底物和產物對CHMO酶催化氧化4-甲基環(huán)己酮的抑制問題,初
2、步研究了樹脂原位底物供給和產物分離技術。對9種樹脂進行篩選比較,得到一種對4-甲基環(huán)己酮及其產物具有較強吸附作SD600,對樹脂和底物的添加比例進行比較,得出1∶2的添加比例比較好。此時溶液中底物濃度既不能抑制酶的活性,同時反應還能以較快的速率進行。通過樹脂原位底物供給和產物分離技術(SFPR),CHMO催化4-甲基環(huán)己酮的底物濃度得到了提高。50mM的底物濃度條件下,轉化率達到了60%左右,而不加樹脂的時候,轉化率只有6%左右,轉化率
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