米非司酮對(duì)早孕絨毛組織Notch-Snail-E-Cadherin表達(dá)的影響.pdf

1、Notch是一種進(jìn)化上十分保守的跨膜受體蛋白家族,能調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖、分化、凋亡等各個(gè)環(huán)節(jié),在胚胎植入發(fā)育和血管形成重建等各方面都發(fā)揮重要作用;米非司酮作為臨床廣泛使用的終止早孕藥物,其抗早孕機(jī)制是否和Notch信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路有關(guān),目前尚不了解。本課題運(yùn)用RT-qPCR、免疫組織化學(xué)的方法檢測(cè)服用不同劑量米非司酮后,早孕絨毛組織中Notch信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中相關(guān)分子的表達(dá)變化,從而了解米非司酮作為抗早孕藥物,對(duì)Notch信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響。課題

2、分為兩部分:(1)米非司酮對(duì)早孕絨毛組織中Notch-1基因在mRNA和蛋白水平表達(dá)的影響;(2)米非司酮對(duì)早孕絨毛組織中Notch下游基因Snail、E-Cadherin在mRNA和蛋白水平表達(dá)的影響以及對(duì)Notch配體D11-4基因在mRNA水平表達(dá)的影響。
　　 第一部分米非司酮對(duì)早孕絨毛組織中Notch-1基因表達(dá)的影響
　　 目的:探討100mg、150mg、200mg三種不同劑量的米非司酮在mRNA和蛋白水平

3、對(duì)早孕絨毛組織中Notch-1基因表達(dá)的影響。
　　 方法:要求終止妊娠的正常早孕婦女80例分四組,組1為對(duì)照組,組2～4術(shù)前分別服用米非司酮100mg、150mg、200mg,每組各20例。運(yùn)用RT-qPCR方法檢測(cè)四組行人工流產(chǎn)后早孕絨毛組織中Notch-1 mRNA的表達(dá);采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)早孕絨毛組織Notch-1蛋白的定位及半定量表達(dá)情況,與對(duì)照組進(jìn)行比較。
　　 結(jié)果:不同劑量的米非司酮對(duì)Notch-1

4、基因mRNA及蛋白表達(dá)的影響,以200mg組作用最為顯著,與其他各劑量組比較差別有顯著意義,100mg組表達(dá)有改變,但與對(duì)照組比較差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;150mg組和對(duì)照組比較,mRNA水平差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,蛋白水平差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;150mg和100mg兩組之間差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Notch-1蛋白以滋養(yǎng)細(xì)胞胞漿表達(dá)為主,間質(zhì)少量表達(dá)。
　　 結(jié)論:早孕絨毛組織中存在Notch-1基因的表達(dá),應(yīng)用米非司酮后其表達(dá)呈升高趨勢(shì),200m

5、g組作用最為顯著。提示米非司酮可能通過調(diào)控絨毛組織中Notch信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,參與抗早孕的作用機(jī)理。
　　 第二部分米非司酮對(duì)早孕絨毛組織中Notch配體及下游基因表達(dá)的影響
　　 目的:探討100mg、150mg、200mg三種不同劑量的米非司酮在mRNA和蛋白水平對(duì)早孕絨毛組織Notch信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路下游基因Snail、E-Cadherin表達(dá)的影響以及對(duì)Notch配體D11-4 mRNA水平表達(dá)的影響。
　　

6、方法:病例與分組同第一部分。運(yùn)用RT-qPCR方法測(cè)定行人工流產(chǎn)后早孕絨毛組織中Snail、E-Cadherin、D11-4 mRNA的表達(dá);采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)早孕絨毛組織Snail、E-Cadherin蛋白的定位及半定量表達(dá)情況,與對(duì)照組進(jìn)行比較。
　　 結(jié)果:
　　 (1)對(duì)Snail基因表達(dá)的影響,mRNA水平與Notch基因一致,200mg劑量組表達(dá)明顯,和其他組比較差別有顯著意義。150mg、100mg組

7、有變化,差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;蛋白水平:200mg與150mg組與對(duì)照組比較明顯上升。100mg組表達(dá)略有上升,差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;Snail蛋白的表達(dá)以滋養(yǎng)細(xì)胞胞核表達(dá)為主,間質(zhì)少量表達(dá)。
　　 (2)米非司酮對(duì)E-Cadherin基因表達(dá)的影響,在mRNA水平各劑量組比較無明顯差別;在蛋白水平200mg組米非司酮明顯降低E-Cadherin的表達(dá);150mg組和100mg組不同程度降低E-Cadherin蛋白的表達(dá),但差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)

8、意義;E-Cadherin蛋白表達(dá)以滋養(yǎng)細(xì)胞胞膜為主,間質(zhì)細(xì)胞少量表達(dá)。
　　 (3)對(duì)D11-4基因mRNA水平表達(dá)的影響:各劑量米非司酮作用后,早孕絨毛組織中D11-4mRNA的表達(dá)略有變化,差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)論:早孕絨毛組織中存在Snail、E-Cadherin、D11-4基因的表達(dá),應(yīng)用米非司酮后,Snail基因表達(dá)上升,E-Cadhein在蛋白水平表達(dá)下降,均以200mg組作用最為顯著;D11-4mR