β-內(nèi)酰胺類抗生素發(fā)酵用玉米漿關(guān)鍵成分的分析.pdf

1、玉米漿是工業(yè)發(fā)酵用培養(yǎng)基的重要組成部分，由于生產(chǎn)工藝、生產(chǎn)批次的差異和有效成分的變化，會影響發(fā)酵產(chǎn)品的產(chǎn)量和質(zhì)量。如何評價和控制用于發(fā)酵的玉米漿質(zhì)量、其有效成分和關(guān)鍵因子水平如何等受到了廣泛關(guān)注。
　　 本文采用高效液相色譜法對β-內(nèi)酰胺類抗生素發(fā)酵用玉米漿中的關(guān)鍵成分——游離氨基酸和B 族維生素進(jìn)行了分析研究；探索建立一種簡便快捷、準(zhǔn)確可靠、專屬性強(qiáng)的測定方法，為抗生素發(fā)酵用玉米漿的質(zhì)量評價和發(fā)酵過程的控制提供依據(jù)。主要有以下

2、幾方面的研究結(jié)果：
　　 （1）建立了以2,4-二硝基氟苯為柱前衍生試劑的反相HPLC測定玉米漿中游離氨基酸的分析方法。該方法步驟簡單、反應(yīng)快速、衍生物穩(wěn)定、剩余試劑對方法無干擾。
　　 18 種氨基酸在50min 內(nèi)可有效分離，重現(xiàn)性、精密度和回收率等各項指標(biāo)均滿足分析要求，證明該方法可有效用于玉米漿中游離氨基酸含量的分析。
　　 （2）測定了發(fā)酵生產(chǎn)用不同批次玉米漿中游離氨基酸的含量，并結(jié)合相對應(yīng)玉米漿的青霉

3、素發(fā)酵結(jié)果進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)玉米漿中游離氨基酸含量變化與青霉素發(fā)酵結(jié)果之間有對應(yīng)關(guān)系。
　　 （3）設(shè)計了添加不同含量氨基酸的玉米漿用于抗生素發(fā)酵試驗，結(jié)果表明玉米漿中氨基酸含量的變化對β-內(nèi)酰胺類抗生素的發(fā)酵有影響的。分析測定青霉素和頭孢菌素C發(fā)酵過程不同階段發(fā)酵液中游離氨基酸含量的變化，并結(jié)合發(fā)酵實(shí)驗結(jié)果初步判斷：
　　 亮氨酸和苯丙氨酸對青霉素發(fā)酵有促進(jìn)作用；谷氨酸、賴氨酸對青霉素發(fā)酵有抑制作用。
　　 谷氨酸

4、和甲硫氨酸對頭孢菌素C發(fā)酵有促進(jìn)作用；賴氨酸對頭孢菌素C發(fā)酵可能無任何積極作用。是否還有其他氨基酸可能對青霉素和頭孢菌素C發(fā)酵生產(chǎn)有影響，需要進(jìn)一步進(jìn)行探索。
　　 （4）對反相HPLC法測定玉米漿中B 族維生素的方法進(jìn)行了初步探討。實(shí)驗采用離子對色譜法對玉米漿中B 族維生素進(jìn)行分離，線性關(guān)系、精密度和分離度良好。研究發(fā)現(xiàn)，加樣回收率不夠理想的主要原因可能是三氯乙酸變性蛋白過程中破壞了玉米漿中的部分維生素，本方法需要對樣品的前處