職業(yè)鋁接觸工人NMDAR和Ⅰ組mGluRs與認(rèn)知功能改變的研究.pdf

1、目的：
　?。?）探討慢性職業(yè)性鋁接觸工人認(rèn)知功能改變及對外周血淋巴細(xì)胞NMDAR和Ⅰ組mGluRs表達(dá)的影響，討論NMDAR和Ⅰ組mGluRs作為認(rèn)知功能改變的外周替代標(biāo)志物的可能性；
　?。?）探討慢性鋁暴露影響外周血淋巴細(xì)胞和腦皮質(zhì)NMDAR和Ⅰ組mGluRs表達(dá)改變是否一致。
　　方法：
　　1.人群流行病學(xué)調(diào)查部分：
　　1）采用整群抽樣法，選取121名電解鋁車間工人和231名熱電車間和后勤部門工

2、人為研究對象。采用健康調(diào)查表收集工人一般情況資料，采用綜合神經(jīng)心理測試量表檢測工人認(rèn)知功能狀況，包括簡易精神狀態(tài)檢查量表（MMSE）、畫鐘試驗(yàn)（CDT）、物體記憶測驗(yàn)（FOM）、言語流暢性試驗(yàn)（VFT）、數(shù)字廣度試驗(yàn)（DST，包括DSF、DSB）。
　　2）應(yīng)用石墨爐原子吸收法（GFAAS）測定血漿鋁含量作為內(nèi)暴露指標(biāo)。應(yīng)用ELISA法測定外周血淋巴細(xì)胞NMDAR和Ⅰ組mGluRs蛋白表達(dá)含量。
　　2.動物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)部分：<

3、br>　　1）選取32只健康雄性SD大鼠，根據(jù)體重隨機(jī)分組，對照組、鋁低、鋁中、鋁高劑量組，分別飼以生理鹽水、20、120、720 mg/L AlCl3飲水，慢性染毒360天。染毒實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，應(yīng)用Morris水迷宮試驗(yàn)進(jìn)行大鼠學(xué)習(xí)記憶能力評價(jià)。
　　2）應(yīng)用 GFAAS檢測大鼠血漿鋁含量及腦皮質(zhì)鋁含量，應(yīng)用RT-PCR和瓊脂糖凝膠電泳檢測NMDAR和Ⅰ組mGluRs基因表達(dá)，應(yīng)用ELISA法檢測NMDAR和Ⅰ組mGluRs蛋白表達(dá)

4、量。
　　結(jié)果：
　　1.人群流行病學(xué)調(diào)查：
　　1）研究對象結(jié)合血漿鋁含量和工種分為對照組[58.15(10.10,88.36)μg/L]、低血漿鋁組[113.19(88.84,139.24)μg/L]、中血漿鋁組[167.43(139.30,203.69)μg/L]、高血漿鋁組[254.62(205.69,374.55)μg/L]，各組血漿鋁含量顯著高于對照組（P<0.01）。
　　2）對人群一般情況分析，調(diào)

5、查對象均為男性，對四組工人年齡、工齡、文化水平、人均收入水平、吸煙史、飲酒史等組間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。認(rèn)知功能量表及神經(jīng)心理測試結(jié)果比較，MMSE、CDT、FOM得分組間比較，P>0.05，DST、DSF、DSB、VFT得分組間比較，P<0.05，對 MMSE多維度分析比較，回憶能力得分組間有差異（P<0.05）。對認(rèn)知功能影響因素進(jìn)行多元逐步回歸分析，血漿鋁、文化水平、年齡為認(rèn)知功能的主要影響因素；
　　3）外周血

6、淋巴細(xì)胞檢測NMDAR和Ⅰ組mGluRs蛋白表達(dá)含量，隨血漿鋁含量增高，外周血淋巴細(xì)胞NMDAR1、NMDAR2A蛋白表達(dá)量下降（P<0.05），高血漿鋁組蛋白表達(dá)量顯著低于對照組（P<0.05），mGluR1蛋白表達(dá)量隨血漿鋁增高而增高（P<0.05），組間比較NMDAR2B蛋白表達(dá)量和mGluR5蛋白表達(dá)量均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。
　　4）對NMDAR1、NMDAR2A、mGluR1蛋白表達(dá)量與血漿鋁含量、認(rèn)知功能指標(biāo)

7、進(jìn)行相關(guān)分析，NMDAR1蛋白表達(dá)量與血漿鋁含量相關(guān)系數(shù) r=-0.475（P<0.05），NMDAR2A蛋白表達(dá)量與血漿鋁含量相關(guān)系數(shù)r=-0.692（P<0.05），mGluR1蛋白表達(dá)量與血漿鋁含量相關(guān)系數(shù)r=0.756（P<0.05）。NMDAR1蛋白表達(dá)量與DSF、DSB、DST、VFT相關(guān)系數(shù) r分別為0.213、0.249、0.271、0.228（P<0.05），NMDAR2A蛋白表達(dá)量與VFT相關(guān)系數(shù)r=0.206（P<

8、0.05），與DSF、DSB、DST相關(guān)系數(shù)分別為0.070、0.071、0.084（P>0.05），mGluR1蛋白表達(dá)量與DSF、DSB、DST、VFT相關(guān)系數(shù)分別為-0.026、0.039、0.005、-0.114（P>0.05）；
　　5）按認(rèn)知功能影響因素分組比較，在文化水平組間和年齡組間比較NMDAR1、NMDAR2A蛋白表達(dá)量，P>0.05；在血漿鋁組間比較蛋白表達(dá)量，P<0.05。
　　2.動物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)部分：

9、
　　1）定位航行試驗(yàn)結(jié)果顯示，大鼠隨學(xué)習(xí)時(shí)間的增加表現(xiàn)出逃避潛伏期呈縮短趨勢，而隨染鋁劑量增加逃避潛伏期延長（P<0.05），鋁高劑量組逃避潛伏期較對照組和鋁低劑量組明顯延長（P<0.05）?？臻g探索試驗(yàn)結(jié)果，與對照組比較，隨染鋁劑量增加大鼠穿越平臺次數(shù)減少（P<0.05），鋁中、高劑量組穿越平臺次數(shù)低于鋁低劑量組（P<0.05）；與對照組比較，隨著染鋁劑量增加大鼠在目標(biāo)象限停留時(shí)間縮短（P<0.05），鋁高劑量組低于對照組和鋁

10、低劑量組（P<0.05）。
　　2）血漿鋁和腦皮質(zhì)鋁含量測定結(jié)果，各劑量組高于對照組（P<0.05）。
　　3）腦皮質(zhì)基因相對表達(dá)量，NMDAR1基因表達(dá)量隨著鋁劑量升高呈下降，鋁中、高劑量組均低與對照組（P<0.05）；NMDAR2A、NMDAR2B、mGluR1、mGluR5基因表達(dá)量隨染鋁劑量增加呈下降趨勢（P<0.05）。外周血淋巴細(xì)胞基因相對表達(dá)量，鋁中、高劑量組NMDAR1基因表達(dá)量低于鋁低劑量組和對照組（P<0

11、.0
　　4）。腦皮質(zhì)NMDAR1蛋白含量檢測，鋁高劑量組低于對照組、鋁低劑量組（P<0.05）。淋巴細(xì)胞NMDAR1蛋白含量檢測，鋁中、高劑量組低于對照組、鋁低劑量組（P<0.05）。對大鼠腦皮質(zhì)與淋巴細(xì)胞NMDAR1蛋白含量進(jìn)行相關(guān)性分析，相關(guān)系數(shù)r=0.646(P<0.05)。RT-PCR檢測大鼠外周血淋巴細(xì)胞 NMDAR2A、NMDAR2B、mGluR1、mGluR5基因未有良好擴(kuò)增曲線。
　　結(jié)論：
　　1.

12、工人長期職業(yè)性鋁接觸可損害其認(rèn)知功能，且短時(shí)記憶損害較為突出；
　　2.人群外周血淋巴細(xì)胞NMDAR1、NMDAR2A、mGluR1蛋白表達(dá)量與血漿鋁含量之間存在相關(guān)性，NMDAR1、NMDAR2A與認(rèn)知功能指標(biāo)之間存在相關(guān)性，二者可作為認(rèn)知功能損害的外周替代標(biāo)志物進(jìn)一步觀察分析；
　　3.慢性鋁暴露大鼠外周血淋巴細(xì)胞與腦皮質(zhì)NMDAR1蛋白表達(dá).隨染鋁劑量增加均下降，二者之間存在相關(guān)性，可將NMDAR1作為學(xué)習(xí)記憶能力損害