

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
1、背景:
梅毒是由梅毒螺旋體感染引起的慢性、性傳播疾病。梅毒螺旋體能夠侵襲人體全身多個器官和系統(tǒng),給患者帶來巨大傷害。二期梅毒為梅毒螺旋體感染的急性期,會出現(xiàn)皮疹、脫發(fā)、粘膜斑、全身淋巴結(jié)腫大,甚至出現(xiàn)內(nèi)臟、眼和神經(jīng)系統(tǒng)損害等;梅毒螺旋體感染會侵犯骨骼、心血管、中樞神經(jīng)等系統(tǒng),引起被侵犯器官的不可逆性損害。侵犯神經(jīng)中樞系統(tǒng)引起的神經(jīng)梅毒帶來的危害巨大,而目前對于其診斷仍然存在挑戰(zhàn),值得關(guān)注。很多研究表明miRNAs在多種疾病的發(fā)
2、生發(fā)展中有重要調(diào)控作用,并在疾病的診斷以及預(yù)后中有重要的應(yīng)用價值。目前,沒有關(guān)于梅毒患者外周血單個核細(xì)胞miRNA表達(dá)譜及其臨床應(yīng)用的報道。本研究采用miRNA芯片檢測二期梅毒和神經(jīng)梅毒患者外周血單個核細(xì)胞的miRNAs表達(dá)譜,篩選出若干差異表達(dá)顯著的miRNAs,并通過real-time qPCR技術(shù)驗證結(jié)果的準(zhǔn)確性,為深入研究miRNAs在梅毒的發(fā)病機制中的作用以及進一步研發(fā)miRNAs作為神經(jīng)梅毒的診斷標(biāo)記物奠定基礎(chǔ)。
3、目的:
探討miRNAs在梅毒感染中的調(diào)控作用及在其分子分型中的潛在應(yīng)用價值。
方法:
1.采用miRNA表達(dá)譜芯片技術(shù)檢測8例二期梅毒患者、6例神經(jīng)梅毒患者和5例健康體檢者的外周血單個核細(xì)胞的miRNAs的差異表達(dá),結(jié)合生物信息學(xué)技術(shù)篩選出顯著差異表達(dá)的miRNAs;
2.采用美國ABI公司設(shè)計合成的miRNA逆轉(zhuǎn)錄引物和表達(dá)分析探針,通過Real-time qPCR方法在30例正常人、31例二
4、期梅毒和33例神經(jīng)梅毒患者中驗證芯片篩選的差異表達(dá)的miRNAs,鑒定芯片的可靠性;
3.通過targetscan、miRDB、RNA22三個數(shù)據(jù)庫預(yù)測差異表達(dá)miRNAs的靶基因,并選擇三個數(shù)據(jù)庫共同支持的靶基因進行GO分析和KEGG pathway分析,為深入研究其生物學(xué)功能奠定理論基礎(chǔ)。
結(jié)果:
1.通過microRNA基因芯片檢測三組樣本中miRNAs表達(dá)譜,以及生物信息差異基因分析和聚類分析共篩選
5、出39條在神經(jīng)梅毒中顯著差異表達(dá)的miRNAs(P<0.05),其中18條miRNAs上調(diào),21條miRNAs下調(diào),二期梅毒中此39條miRNAs表達(dá)水平介于兩者之間,提示可能存在特異性的miRNA可以作為診斷神經(jīng)梅毒的分子標(biāo)記物;
2.實時熒光定量PCR驗證13條差異表達(dá)的miRNAs,13條差異表達(dá)的miRNAs表達(dá)趨勢在各組之間與芯片結(jié)果一致,因此芯片結(jié)果的驗證率為100%,芯片結(jié)果具有較高的可靠性;
3.利用
6、targetscan、miRDB和RNA22三個miRNA靶基因數(shù)據(jù)庫預(yù)測靶基因,取靶基因交集后發(fā)現(xiàn)39條miRNAs共有靶基因5489個;
4.對預(yù)測的靶基因進行GO分析后發(fā)現(xiàn)miRNA調(diào)控的靶基因在生物進程上主要參與轉(zhuǎn)錄調(diào)控、RNA代謝過程調(diào)控、細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、蛋白結(jié)合、細(xì)胞凋亡、程序性死亡等過程;而在細(xì)胞組成上,靶基因主要定位于細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)以及細(xì)胞內(nèi)的細(xì)胞器等部位;其參與的分子功能主要集中于金屬離子的結(jié)合、核苷酸分子的
7、結(jié)合、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子的激活等方面;
5.針對預(yù)測的靶基因進行KEGG pathway分析后,發(fā)現(xiàn)miRNA調(diào)控的靶基因主要參與細(xì)胞凋亡、B細(xì)胞信號通路、內(nèi)吞作用、焦點粘連、白細(xì)胞經(jīng)內(nèi)皮遷移通路、趨化因子信號通路、T細(xì)胞信號等通路;
6.預(yù)測miR-21-3p靶基因參與機體重要的免疫調(diào)節(jié)信號通路,下調(diào)機體免疫,推測其在梅毒感染過程中協(xié)助梅毒螺旋體的長期潛伏,形成慢性感染。
結(jié)論:
本研究通過miRNA
8、芯片技術(shù)在二期梅毒和神經(jīng)梅毒患者PBMC中篩選出39條差異表達(dá)的miRNAs,并且通過熒光定量PCR探針法擴大檢測臨床樣本后驗證芯片結(jié)果具有較高的可靠性;39條差異表達(dá)的miRNAs在三組之間差異明顯,可以有效區(qū)分神經(jīng)梅毒,提示miRNAs可能可以用于梅毒的分子分型,為進一步尋找外周血的miRNAs作為神經(jīng)梅毒的診斷和預(yù)后的標(biāo)記物奠定了重要基礎(chǔ);生物信息學(xué)預(yù)測了了差異表達(dá)的miRNAs靶基因,并分析其潛在的生物學(xué)功能及相關(guān)的分子機制。初
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 早期梅毒和血清固定患者外周血單個核細(xì)胞基因表達(dá)譜和miRNAs表達(dá)譜的研究.pdf
- 梅毒血清固定患者的治療及其外周血單個核細(xì)胞microRNAs表達(dá)譜的研究.pdf
- SLE患者外周血單個核細(xì)胞CD43基因的表達(dá).pdf
- OAB患者外周血單個核細(xì)胞中相關(guān)基因表達(dá)的研究.pdf
- 原發(fā)性膽汁性肝硬化患者外周血單個核細(xì)胞基因表達(dá)譜的相關(guān)研究.pdf
- 胃癌患者外周血單個核細(xì)胞HLA表達(dá)研究.pdf
- 甘蔗受黑穗病菌脅迫下microRNA差異表達(dá)及其靶基因功能分析.pdf
- Toll樣受體4 mRNA在梅毒血清固定患者外周血單個核細(xì)胞的表達(dá).pdf
- 多發(fā)性肌炎-皮肌炎外周血單個核細(xì)胞microRNA表達(dá)譜分析.pdf
- 高尿酸血癥患者血漿microRNA表達(dá)譜分析及其靶基因預(yù)測研究.pdf
- TET3基因mRNA在SLE患者外周血單個核細(xì)胞表達(dá)水平研究.pdf
- Graves病患者外周血單個核細(xì)胞上PRLRmRNA的表達(dá).pdf
- PACAP、BDNF在頭痛患者外周血單個核細(xì)胞中mRNA表達(dá).pdf
- Toll樣受體2、4mRNA在梅毒患者外周血單個核細(xì)胞中的表達(dá)及意義.pdf
- 應(yīng)用基因表達(dá)譜芯片篩選胰腺癌病人外周血單個核細(xì)胞的腫瘤相關(guān)基因.pdf
- SLE患者外周血單個核細(xì)胞NF-κBp65表達(dá)及其意義.pdf
- 人類microRNA特異性表達(dá)分析方法與靶基因功能分析工具開發(fā).pdf
- 卒中后抑郁患者外周血單個核細(xì)胞p11基因表達(dá)的變化.pdf
- 外周血單個核細(xì)胞hTERT基因表達(dá)對肺癌診斷的意義.pdf
- 對哮喘患兒外周血單個核細(xì)胞RELA基因表達(dá)的研究.pdf
評論
0/150
提交評論