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1、目的:我們前期研究發(fā)現(xiàn)給小鼠腹腔注射三氮脒溶液可以通過(guò)激活眼內(nèi)血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2的活性減輕葡萄膜炎。本實(shí)驗(yàn)研究局部應(yīng)用三氮脒滴眼液的抑炎效果并探討NF-κB和p38 MAPK是否參與其抑炎效果的調(diào)控。
方法:將6-8周SD大鼠54只隨機(jī)分成6組,即:空白對(duì)照組、模型組、0.025%三氮脒給藥組、0.05%三氮脒給藥組、0.1%三氮脒給藥組、0.1%地塞米松組給藥組。每?jī)蓚€(gè)小時(shí)滴眼一次,每次10μl,每天滴眼6次連續(xù)兩天。第一天
2、最后一次給藥后在大鼠皮下注射200μg的內(nèi)毒素誘導(dǎo)葡萄膜炎。注射內(nèi)毒素24小時(shí)后行裂隙燈照相和臨床評(píng)分。抽取房水,分離虹膜睫狀體復(fù)合物。BCA蛋白定量試劑盒定量房水蛋白。用ELISA試劑盒檢測(cè)房水中TNF-α,IL-6蛋白濃度。Real-time PCR檢測(cè)虹膜睫狀體復(fù)合物中炎癥因子IL-1β,TNF-α,iNOS,COX-2以及NF-κB p65的表達(dá)。Western Blot檢測(cè)虹膜睫狀體復(fù)合物中NF-κB p65和磷酸化的p38
3、MAPK蛋白量。用CD11b對(duì)空白對(duì)照組、模型組、0.1%三氮脒給藥組、0.1%地塞米松給藥組中虹膜睫狀體中炎癥細(xì)胞進(jìn)行染色。
結(jié)果:0.05%,0.1%三氮脒組和地塞米松組均能明顯降低葡萄膜炎臨床評(píng)分與房水蛋白濃度。0.1%三氮脒可以減少房水中TNF-α,IL-6炎癥蛋白的表達(dá),同時(shí)抑制虹膜睫狀體復(fù)合物中炎癥因子 IL-1β, TNF-α,iNOS,COX-2以及NF-κB p65(p<0.01)的mRNA表達(dá),以及NF-κ
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