腸上皮細胞內(nèi)毒素反應(yīng)性及其耐受內(nèi)毒素的分子機制研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:①探討人正常腸上皮細胞(IEC)的分離、培養(yǎng)及鑒定方法.②觀察人腸上皮細胞對內(nèi)毒素刺激的反應(yīng)性,探討其耐受內(nèi)毒素的分子機制.結(jié)論:①選用嗜熱菌蛋白作酶作為分離IEC的消化酶,改善IEC的生長環(huán)境,經(jīng)過簡便的純化,即可獲得較純的IEC,完全可供相關(guān)實驗研究之用.②該研究以檢測NF-κB的激活和IL-8的分泌為客觀指標,首次觀察了小腸上皮細胞對內(nèi)毒素刺激的反應(yīng)性,進一步證實,與單核/巨噬細胞不同,腸上皮細胞呈內(nèi)毒素無反應(yīng)性.③首次用R

2、T-PCR和RPA兩種方法同時研究了人原代小腸上皮細胞和人小腸癌上皮細胞內(nèi)三種內(nèi)毒素相關(guān)受體mRNA的表達特點,發(fā)現(xiàn)無論人原代小腸上皮細胞和人小腸癌上皮細胞TLR4,CD14和MD2呈低表達或不表達.④采用基因轉(zhuǎn)染技術(shù),首次揭示了腸上皮細胞表面TLR4,CD14和MD2低表達或不表達與細胞內(nèi)毒素無反應(yīng)性之間的內(nèi)在聯(lián)系,明確了腸上皮細胞耐受內(nèi)毒素作用的分子機制,同時進一步反證了CD14,TLR4和MD2在調(diào)控單核/巨噬細胞內(nèi)毒素跨膜信號轉(zhuǎn)

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