內(nèi)毒素激活大鼠枯否細(xì)胞及其對肝細(xì)胞損害機(jī)制的研究.pdf

1、目前,關(guān)于mCD14在參與LPS激活骨髓源性細(xì)胞(尤其是巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞)中的作用已有一些研究報(bào)道.研究表明mCD14在低濃度LPS激活巨噬細(xì)胞中是必需的;枯否氏細(xì)胞(KC)是體內(nèi)最大的組織巨噬細(xì)胞群,由于其所處位置的特殊性,它可能具有一些不同于其它巨噬細(xì)胞的特征.因此,KC的激活及其功能性反應(yīng)對局部肝組織甚至全身的損傷有十分重要的意義.迄今,關(guān)于LPS激活KC的分子機(jī)制及其確切的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑尚未完全清楚,近年有人認(rèn)為LPS激活KC

2、并非mCD14依賴的,而與Toll受體介導(dǎo)有關(guān).Toll是一種果蠅個(gè)體發(fā)育和先天性免疫所必需的基因.人細(xì)胞中Toll蛋白的類似物稱為Toll樣受體(TLRs).目前已克隆了6種人的TLRs,即TLR1~6.其中研究較多的是TLR2和TLR4.研究證實(shí):TLR2和TLR4均能有效地作為LPS受體并參與細(xì)胞的激活,其中尤以TLR4更為重要.TLR4缺乏或突變小鼠的巨噬細(xì)胞不能參與LPS反應(yīng).然而,對TLRs的研究還有很多問題需要解決:諸如L

3、PS是直接作為TLRs的配體還是通過尚不知曉的方式產(chǎn)生配體來發(fā)揮其激活細(xì)胞的功能;TLRs介導(dǎo)細(xì)胞激活所引起的細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑;TLRs的分布、合成及調(diào)節(jié)規(guī)律;TLRs與CD14的關(guān)系等.該實(shí)驗(yàn)旨在應(yīng)用細(xì)胞原代培養(yǎng)、光鏡和電鏡觀察、免疫組化、RT-PCR、圖像分析、放免分析等方法探討以下問題:(1)LPS對KC受體CD14和TLR4的調(diào)節(jié);(2)LPS激活KC后產(chǎn)生的活性介質(zhì)對CD14和TLR4表達(dá)的影響;(3)絲裂源激活的蛋白激酶(