ICD對(duì)肝細(xì)胞癌側(cè)群細(xì)胞增殖抑制及其機(jī)制研究.pdf

1、肝細(xì)胞癌中的側(cè)群細(xì)胞是一類高度耐藥細(xì)胞群，對(duì)多種常規(guī)腫瘤化療藥物不敏感，研究靶向側(cè)群細(xì)胞的藥物有助于提高肝細(xì)胞癌對(duì)化療藥物的敏感性。異紫堇定堿（Isocorydine，ICD）是一種潛在的抗腫瘤天然生物堿，本研究首次發(fā)現(xiàn)ICD可以顯著降低肝細(xì)胞癌細(xì)胞系中側(cè)群細(xì)胞的比例，從而增加肝癌細(xì)胞對(duì)傳統(tǒng)化療藥物如阿霉素(Doxorubicin，DXR)等的敏感性，阿霉素的細(xì)胞外排與細(xì)胞內(nèi)滯留實(shí)驗(yàn)表明ICD不僅可以增加肝癌細(xì)胞對(duì)阿霉素的攝入，還減少了

2、細(xì)胞對(duì)阿霉素的外排，尤其是延長(zhǎng)了阿霉素在核內(nèi)的滯留時(shí)間。BrdU摻入實(shí)驗(yàn)顯示與非側(cè)群細(xì)胞相比，ICD對(duì)側(cè)群細(xì)胞有選擇性增殖抑制作用。處理早期，ICD通過引起細(xì)胞周期G2/M期阻滯抑制側(cè)群細(xì)胞的生長(zhǎng)，后期則誘導(dǎo)側(cè)群細(xì)胞的凋亡，同時(shí)蛋白印跡檢測(cè)結(jié)果顯示ICD改變了多個(gè)凋亡相關(guān)基因的表達(dá):活化了capase家族的caspase-9、caspase-8和caspase-12;激活了細(xì)胞膜和線粒體膜上凋亡調(diào)節(jié)蛋白，上調(diào)死亡受體Fas以及Bcl-2

3、家族的抗凋亡成員如Bad、Bax、Bak和Bim的蛋白表達(dá)，下調(diào)了Bcl-2家族的抗凋亡成員Bcl-2的蛋白表達(dá)。免疫缺陷小鼠移植瘤試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)一步證明ICD選擇性地降低了側(cè)群細(xì)胞形成的皮下移植瘤的體積和重量，因此ICD可能是一個(gè)靶向肝癌側(cè)群細(xì)胞的候選藥物。程序性細(xì)胞死亡蛋白4是一個(gè)抑癌基因并與凋亡密切相關(guān)，與非側(cè)群細(xì)胞相比，程序性細(xì)胞死亡蛋白4在側(cè)群細(xì)胞中表達(dá)水平較低。而ICD處理后，側(cè)群細(xì)胞中程序性細(xì)胞死亡蛋白4表達(dá)明顯上調(diào)，體內(nèi)移植