THAP11基因抑制細胞增殖及其機制的研究.pdf

1、THAPll屬于新發(fā)現(xiàn)的THAP蛋白家族。該家族因含有與P元件轉座酶DBD高度同源的THAP結構域而得名。研究表明這是一類鋅離子依賴的DNA結合蛋白，廣泛參與細胞增殖、凋亡調控，并可能與染色體修飾／重構相關。 THAP11表達廣泛，無明確組織特異性。cDNA微陣列芯片檢測顯示，與相應癌旁組織相比，THAPll在多種腫瘤組織中表達明顯下調；采用可誘導表達THAPll的HEK293穩(wěn)定細胞株發(fā)現(xiàn)：誘導THAPll表達可抑制HEK29

2、3細胞增殖。此外，THAPll表達也能明顯抑制7721、HeLa和MCF-7細胞的集落形成能力，說明THAP11是一個生長抑制基因。進一步研究發(fā)現(xiàn)THAP11通過抑制c-myc啟動子的轉錄活性，引起c-myc表達下調，以及ODC、Nucleolin等c-myc靶基因表達下調，進而導致細胞生長抑制。轉染c-myc表達質粒，恢復c-myc表達，能使THAP11引發(fā)的集落形成抑制現(xiàn)象得到顯著緩解，表明負調控c-myc轉錄是THAPll抑制增殖

3、的重要原因。 鑒于c-myc在細胞增殖、分化以及細胞惡性轉化過程中的重要地位，研究了THAPll抑制c-myc轉錄的機制。通過構建c-myc啟動子缺失突變的報告基因載體，將THAPll實現(xiàn)調控的區(qū)域定位在c-mycP2啟動子上游-710bp～-484bp處；ChIP實驗證實THAP11在體內能與這一區(qū)域的DNA序列結合；合成探針并用EMSA實驗確定了THAPll識別并結合的特異DNA序列，說明THAP11通過結合在c-myc啟動