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文檔簡介
1、目的:研究肝細胞生長因子(hepatocyte growth factor,HGF)對肝細胞癌SMMC-7721的上皮-間葉轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的作用,并對其機制進行探討。
方法:應(yīng)用傳代細胞培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)SMMC-7721細胞株,采用HGF最佳濃度處理該細胞株,通過 Transwell實驗、劃痕實驗、Wester blot技術(shù)研究 HGF對肝癌細胞SMMC-7721
2、 EMT的作用;同時,采用 PI3K抑制物 LY29400210μmol/L預(yù)處理SMMC-7721細胞株,再加入相同濃度的HGF處理該細胞,然后與未經(jīng)LY294002預(yù)處理的HGF作用細胞進行對比研究,探討PI3K對于HGF作用機制的影響。
結(jié)果:(1)劃痕實驗和Transwell實驗顯示HGF處理的細胞侵襲和轉(zhuǎn)移能力與未處理細胞相比明顯增強,Wester blot結(jié)果顯示HGF處理的細胞的N-cadherin、MMP-2、
3、MMP-9、Vimentin表達增加,E-cadherin表達減少;(2)LY294002預(yù)處理后,細胞不再受HGF的影響,細胞的形態(tài)沒有明顯變化,Transwell實驗和劃痕實驗結(jié)果與未經(jīng)處理的SMMC-7721相同;Wester blot結(jié)果顯示:細胞的N-cadherin、MMP-2、MMP-9、Vimentin、E-cadherin的表達變化不明顯。
結(jié)論:1.HGF能夠促進SMMC-7721的上皮間葉轉(zhuǎn)化、增強其侵襲
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