肝細(xì)胞癌侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)基因表達(dá)的組織芯片研究.pdf

1、目的：研究Survivin蛋白、SurvivinmRNA、p27蛋白、p27mRNA、PTEN蛋白和KAl-1／CD82蛋白在肝細(xì)胞癌(HCC)中的表達(dá)及其在HCC侵襲轉(zhuǎn)移中的作用。 方法：構(gòu)建含有HCC、癌旁肝組織、遠(yuǎn)癌肝組織、肝內(nèi)轉(zhuǎn)移灶和正常肝組織的組織芯片。應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法PV-9000二步法和原位核酸雜交技術(shù)檢測(cè)Survivin蛋白、p27蛋白、PTEN蛋白、KAl．1／CD82蛋白和SurvivinmRNA、p27

2、mRNA在141例HCC、128例癌旁肝組織、97例遠(yuǎn)癌肝組織及17例正常肝組織中的表達(dá)，并進(jìn)一步分析KAl-1／CD82蛋白在其中36例HCC原發(fā)灶和相應(yīng)的肝內(nèi)轉(zhuǎn)移灶的表達(dá)情況。 結(jié)果： 1、手工構(gòu)建的組織芯片具有較好的質(zhì)量，其平均總脫片率為5．27％，平均總有效率為97．40％ 2、與癌旁組、遠(yuǎn)癌組及正常組相比，HCC組中Survivin蛋白、SurvivinmRNA和p27蛋白表達(dá)均明顯增高；PTEN蛋白和

3、KAl．1／CD82蛋白表達(dá)均明顯下降；p27mRNA表達(dá)無顯著差異；上述各指標(biāo)在癌旁組、遠(yuǎn)癌組和正常組中的表達(dá)均無顯著差異。 3、與肝內(nèi)無轉(zhuǎn)移組相比，肝內(nèi)轉(zhuǎn)移組中Survivin蛋白、SurvivinmRNA的表達(dá)水平均顯著升高而p27蛋白、PTEN蛋白和KAI-1／CD82蛋白的表達(dá)水平均顯著下降；與包膜無侵犯組相比，包膜侵犯組中Survivin蛋白的表達(dá)水平顯著升高而PTEN蛋白和KAl-1／CD82蛋白的表達(dá)水平均顯著下

4、降。p27蛋白和PTEN蛋白的表達(dá)還與腫瘤大小有關(guān)，隨腫瘤直徑增大p27蛋白和PTEN蛋白的表達(dá)水平均顯著下降。Survivin蛋白、SurwivinmRNA和PTEN蛋白的表達(dá)亦與HCC的病理學(xué)分級(jí)有關(guān)，隨病理學(xué)分級(jí)的增高Survivin蛋白和SurvivinmRNA的表達(dá)水平顯著升高而PTEN蛋白的表達(dá)水平顯著下降。上述指標(biāo)均與性別、年齡、組織學(xué)類型和肝外轉(zhuǎn)移與否無關(guān)。p27mRNA的表達(dá)與HCC的臨床病理學(xué)參數(shù)均無關(guān)。 4

5、、KAl．1／CD82蛋白在36例HCC原發(fā)灶中的表達(dá)顯著高于相應(yīng)的肝內(nèi)轉(zhuǎn)移灶。 5、相關(guān)分析顯示：HCC中Survivin蛋白的表達(dá)與SurvivinmRNA的表達(dá)呈正相關(guān)，與p27蛋白、PTEN蛋白和KAl．1／CD82蛋白的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)；SurvivinmRNA的表達(dá)僅與Survivin蛋白的表達(dá)呈正相關(guān)，與p27蛋白的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)；p27蛋白的表達(dá)與p27mRNA、PTEN蛋白和KAl．1／CD82蛋白的表達(dá)呈正相關(guān)，與

6、Survivin蛋白和SurvivinmRNA的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)；p27mRNA的表達(dá)僅與p27蛋白、PTEN蛋白和KAl．1／CD82蛋白的表達(dá)呈正相關(guān)；PTEN蛋白的表達(dá)與p27蛋白、p27mRNA和KAl．1／CD82蛋白的表達(dá)呈正相關(guān)，與Surivivin蛋白的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)；KAl-1／CD82蛋白的表達(dá)與p27蛋白、p27mRNA和PTEN蛋白的表達(dá)呈正相關(guān)，與Survivin蛋白的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。 6、判別分析顯示，Sur

7、vivinmRNA、p27蛋白、PTEN蛋白和KAI-1／CD82蛋白對(duì)于區(qū)分HCC和非HCC有顯著的判別能力；SurvivinmRNA和PTEN蛋白對(duì)HCC的轉(zhuǎn)移情況有顯著的判別能力。 結(jié)論： 1、手工制備組織芯片方法簡(jiǎn)單、價(jià)格低廉，且具有較高質(zhì)量，適于科研和臨床應(yīng)用。 2、Survivin蛋白、SurvivinmRNA、p27蛋白表達(dá)增高以及PTEN蛋白、KAl．1／CD82蛋白表達(dá)下降參與了HCC的發(fā)生和發(fā)