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文檔簡介
1、目的:研究證實子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)病與子宮內(nèi)膜發(fā)生“黏附-侵襲-血管生成”這三個病理過程密不可分。阻斷三者之一,可以控制子宮內(nèi)膜異位癥的病情進(jìn)展。而ICAM-1、MMP-2、VEGF分別是這三個過程中的關(guān)鍵因子。本實驗運用細(xì)胞分子生物學(xué)的方法,分別分離培養(yǎng)出對照組子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞,子宮內(nèi)膜異位癥患者在位內(nèi)膜、異位內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞,運用實時熒光定量PCR檢測這三組細(xì)胞中ICAM-1、MMP-2、VEGF的mRNA表達(dá)情況。再運用實時熒光定量PC
2、R檢測不同濃度少腹逐瘀湯對子宮內(nèi)膜異位癥患者異位、在位內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞分泌ICAM-1、MMP-2、VEGF的影響。探討少腹逐瘀湯防治子宮內(nèi)膜異位癥的可能原因,臨床上為應(yīng)用少腹逐瘀湯治療子宮內(nèi)膜異位癥的可能性提供理論依據(jù)。
方法:1.取10例寒凝血瘀型子宮內(nèi)膜異位癥患者的異位內(nèi)膜、在位內(nèi)膜為研究組,取10例單純子宮平滑肌瘤患者的子宮內(nèi)膜為對照組,培養(yǎng)出各組的子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞。2.運用實時熒光定量PCR檢測出各組第4代子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)
3、胞中ICAM-1、MMP-2、VEGF的mRNA表達(dá)情況。3.在第4代在位內(nèi)膜、異位內(nèi)膜組間質(zhì)細(xì)胞中加入濃度分別為20g/L、10g/L、5g/L、2.5g/L、1.25g/L、0.625g/L、0.3125g/L的少腹逐瘀湯。運用實時熒光定量 PCR測定加藥后在位內(nèi)膜、異位內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞及培養(yǎng)基中 ICAM-1、MMP-2、VEGF的mRNA表達(dá)情況,并進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。
結(jié)果各組子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞實時熒光定量PCR的檢測結(jié)果:I
4、CAM-1:異位內(nèi)膜組子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞ICAM-1mRNA表達(dá)明顯高于在位內(nèi)膜組,而在位內(nèi)膜組又明顯高于對照組;MMP-2:異位內(nèi)膜組子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞MMP-2 mRNA表達(dá)明顯高于在位內(nèi)膜組,而在位內(nèi)膜組又明顯高于對照組;VEGF:異位內(nèi)膜組子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞VEGF mRNA表達(dá)明顯高于在位內(nèi)膜組,而在位內(nèi)膜組又明顯高于對照組;差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。加少腹逐瘀湯后,實時熒光定量PCR的檢測結(jié)果:在位內(nèi)膜組:加藥后,細(xì)胞及
5、培養(yǎng)基中ICAM-1、MMP-2、VEGF mRNA的表達(dá)均較未加藥組下降。異位內(nèi)膜組:加藥后,細(xì)胞及培養(yǎng)基中ICAM-1、MMP-2、VEGFmRNA的表達(dá)也較未加藥組下降。差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。且這種下降的趨勢與加藥濃度密切相關(guān)。在位內(nèi)膜組:當(dāng)濃度增加至5g/L時,ICAM-1、MMP-2、VEGF的mRNA表達(dá)下降至低谷,隨著濃度增加,ICAM-1、MMP-2、VEGF的mRNA表達(dá)呈上升趨勢,但上升幅度不大,且始終
6、低于未加藥。異位內(nèi)膜組:當(dāng)濃度增加至5g/L時,ICAM-1、MMP-2、VEGFmRNA的表達(dá)均下降至低谷。隨著濃度增加,3個因子的表達(dá)上升,但幅度平緩,仍低于未加藥組。結(jié)論1.作為“黏附-侵襲-血管生成”這三個步驟中的重要因子,ICAM-1、MMP-2、VEGF的分泌在對照組、異位內(nèi)膜組、在位內(nèi)膜組子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞中差異顯著,說明這3個因子與子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),可以作為判定少腹逐瘀湯防治子宮內(nèi)膜異位癥的有效指標(biāo)。2.少
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