Wif1在大腦新皮質(zhì)發(fā)育過程中的功能初探.pdf

1、Wnt信號通路在個體發(fā)育尤其是大腦神經(jīng)發(fā)育的過程中起著重要作用,而Wif1是Wnt分泌蛋白的胞外抑制因子。本實驗室的前期工作對Wif1在小鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育中的表達譜進行了研究,結(jié)果表明Wif1在端腦發(fā)育過程中呈現(xiàn)從medial wall至lateral cortex由高到低的濃度梯度;Wif1表達于在端腦發(fā)育的信號調(diào)控中心cortical hem(CH)之外的區(qū)域,而自始至終在CH區(qū)域不表達,生后則特異性表達于海馬傘的邊緣部分,也即C

2、H被海馬傘擠壓退縮的部位。說明1)Wif1很可能是一個形態(tài)發(fā)生原;2)Wif1可能與特異性表達于CH的其他因子相互作用,調(diào)控端腦發(fā)育,但機制有待深入研究。為此,我們利用胚胎電轉(zhuǎn)技術(shù)在端腦新皮質(zhì)處過表達Wif1以破壞其內(nèi)源性濃度梯度,以期對其在端腦發(fā)育中的功能做初步探討。結(jié)果顯示:Wif1過表達導(dǎo)致細胞遷移變快,與對照相比,有更多比例的神經(jīng)元由皮質(zhì)的Ⅱ-Ⅳ層遷移到到MZ區(qū)。同時,在Wif1過表達區(qū)域膠質(zhì)支架出現(xiàn)明顯的紊亂。過表達Wif1的

3、皮質(zhì)最外層處有明顯的異常凸起,皮質(zhì)淺層Ⅱ-Ⅳ層的細胞排列也呈現(xiàn)相應(yīng)凸起:同時皮質(zhì)深層marker Ctip2也顯示這一細胞遷移加速的現(xiàn)象。這些結(jié)果提示我們Wif1很可能是一個對神經(jīng)元遷移有重要影響的因子。
　　 CH是端腦發(fā)育的重要信號中心,它以一系列進化上保守的機制調(diào)控著端腦發(fā)育,它不僅誘導(dǎo)海馬形成,調(diào)節(jié)海馬分化及其結(jié)構(gòu)組成,同時也參與背側(cè)皮質(zhì)的發(fā)育調(diào)控。大量Wnt和Bmp家族的成員在CH處特異性表達;但亦有一些基因在CH處特

4、異性地不表達,如Wif1。為了探明Wif1是否與CH中的因子相互作用從而調(diào)控端腦發(fā)育及其作用機制,我們通過分子生物學(xué)手段構(gòu)建了Fzd10-Wif1-EFGP轉(zhuǎn)基因小鼠,利用特異性表達于CH的Wnt受體Fzd10的啟動子,使Wif1異位表達在CH這個重要的神經(jīng)信號調(diào)控中心,觀察其對端腦發(fā)育的影響及作用機制。目前已經(jīng)獲得7個founder,對其中1個經(jīng)過初步鑒定,Wif1特異性表達于CH,并可穩(wěn)定遺傳,在該轉(zhuǎn)基因小鼠中觀察到海馬齒狀回上葉出