二甲雙胍對(duì)db-db小鼠糖尿病腎病的治療作用及機(jī)制.pdf

1、目前全球糖尿病患者是一支龐大的隊(duì)伍，此慢性病治愈率低病程漫長(zhǎng)，并發(fā)癥多，患者生活質(zhì)量下降，甚至喪失勞動(dòng)能力。其較常見(jiàn)較嚴(yán)重的并發(fā)癥是糖尿病腎病。糖尿病腎病發(fā)病較隱匿，在疾病的早期階段患者尿中可出現(xiàn)微量白蛋白，癥狀不易察覺(jué)，疾病終末階段可表現(xiàn)為大量蛋白尿。繼而導(dǎo)致腎小球硬化及腎臟纖維化，最終導(dǎo)致腎臟衰竭。但是目前對(duì)糖尿病腎病仍缺乏明顯有效的治療手段，臨床以對(duì)癥治療為主，如降低腎小球高濾過(guò)率、降低尿蛋白等。
　　二甲雙胍是控制糖尿病高

2、血糖狀態(tài)的雙胍類降糖藥。此藥在臨床應(yīng)用時(shí)間久，安全性高。二甲雙胍通過(guò)減少肝臟糖原輸出和增加機(jī)體對(duì)胰島素敏感性等降低血糖，減低患者體重，減低外周組織對(duì)胰島素的抵抗，二甲雙胍能否治療糖尿病腎病，在臨床還未明確。
　　近年來(lái)越來(lái)越多的研究表明，氧化應(yīng)激增強(qiáng)以及活性氧產(chǎn)生過(guò)多與糖尿病腎病的發(fā)生發(fā)展有密切聯(lián)系。腎小管上皮細(xì)胞可通過(guò)上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化成為肌成纖維細(xì)胞進(jìn)入間質(zhì)，合成細(xì)胞外基質(zhì)，直接導(dǎo)致腎纖維化，其也是參與糖尿病腎病發(fā)展的一個(gè)明確機(jī)制

3、。本研究以db/db糖尿病腎病小鼠為模型，觀察二甲雙胍能否通過(guò)抑制腎臟的氧化應(yīng)激和上皮細(xì)胞間充質(zhì)轉(zhuǎn)分化過(guò)程緩解糖尿病腎病的病情。
　　目的:
　　以db/db糖尿病腎病小鼠為模型，觀察二甲雙胍干預(yù)后對(duì)糖尿病腎病的影響，并深入揭示其作用機(jī)制。
　　方法:
　　15只均為8周的雌性小鼠，10只C57BL/KsJ db/db小鼠，5只C57BL/KsJdb/m小鼠。在同樣的環(huán)境中分籠喂養(yǎng)一周。其中5只db/m小鼠為正常

4、對(duì)照組，將10只db/db小鼠每組5只隨機(jī)平均分為模型組和二甲雙胍治療組。以二甲雙胍（溶于0.5％生理鹽水）0.0042g/(kg·d)的劑量給治療組小鼠灌胃，對(duì)照組給以相同劑量的生理鹽水灌胃，連續(xù)給藥12周。給藥結(jié)束后，處死三組小鼠，稱體重、腎重，用代謝籠收集24h尿標(biāo)本檢測(cè)尿微量白蛋白量，采血檢測(cè)血糖、尿素氮和肌酐，留取腎組織行PAS和MASSON染色，試劑盒檢測(cè)氧化應(yīng)激指標(biāo)SOD、CAT和MDA的含量，Western blot蛋白

5、電泳方法檢測(cè)各組腎臟蛋白混合液中E-cadherin和α-SMA的表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　(1) db/db模型組和二甲雙胍治療組小鼠初始腎重、體重?zé)o差異，二甲雙胍治療后均有下降趨勢(shì)但仍高于正常組;db/db模型組和二甲雙胍治療組小鼠腎重/體重指數(shù)無(wú)顯著差異。
　　(2) db/db模型組和二甲雙胍治療組小鼠血糖水平無(wú)顯著差異，但較正常組小鼠有明顯升高;與正常組小鼠相比，db/db模型組小鼠血尿素氮和肌酐、24小時(shí)尿微

6、量白蛋白水平均明顯升高，二甲雙胍治療后較模型組有明顯下降。
　　(3)與正常組小鼠相比，腎臟PAS和MASSON染色結(jié)果示db/db模型組小鼠腎小球肥大，毛細(xì)血管基底膜增厚，系膜區(qū)面積增寬，包括系膜細(xì)胞增生和系膜基質(zhì)增多，腎間質(zhì)膠原纖維含量增多;二甲雙胍治療組小鼠腎臟上述病理改變較db/db模型組有不同程度的減輕。
　　(4)與正常組小鼠相比，SOD和CAT的活性在db/db模型組明顯降低，而MDA的表達(dá)明顯較正常對(duì)照組高。

7、二甲雙胍干預(yù)后的db/db模型組小鼠腎臟中SOD和CAT活性明顯升高，而MDA的表達(dá)明顯降低。
　　(5)與正常組小鼠相比，db/db小鼠腎臟上皮表型標(biāo)志分子E-cadherin表達(dá)水平明顯降低，而間質(zhì)表型分子α-SMA表達(dá)增高，二甲雙胍治療后db/db小鼠腎臟上皮表型標(biāo)志分子E-cadherin表達(dá)明顯升高，而間質(zhì)表型分子α-SMA表達(dá)明顯降低。
　　結(jié)論:
　　二甲雙胍明顯減輕了db/db模型組小鼠的腎小球硬化及腎