使用LOx-1靶向USPIO早期診斷db-db小鼠糖尿病腎病的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?LOX-1介導(dǎo)的廣泛性炎癥反應(yīng)在在DN病程中具有關(guān)鍵作用，本研究旨在研究使用LOX-1靶向USPIO探針早期檢測DN小鼠腎臟中炎性病灶的可行性。
　　材料方法:使用抗LOX-1單克隆抗體及非特異性IgG抗體與高分子聚乙二醇包被的USPIO納米顆粒連接，分別合成LOX-1靶向USPIO及非靶向USPIO。USPIO體外實(shí)驗(yàn)采用RAW264.7巨噬細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)對象，在體實(shí)驗(yàn)選用db/db小鼠為動(dòng)物模型，并通過血尿生化分析確定

2、DN的發(fā)生。DN小鼠與正常對照組小鼠隨機(jī)分為LOX-1靶向USPIO組及非靶向USPIO組，在注射對比劑（10mg Fe/kg）前及注射24h后分別進(jìn)行核磁共振成像。使用普魯士藍(lán)染色及免疫組化染色分別檢測鐵沉積狀況及LOX-1/CD68表達(dá)。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果:體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)，LOX-1靶向USPIO可被巨噬細(xì)胞選擇性吞噬。活體實(shí)驗(yàn)中，所有db/db小鼠均確認(rèn)發(fā)生DN癥狀，在注射靶向USPIO24h后，T2*MRI顯示腎皮質(zhì)區(qū)信號降低，

3、且信號改變百分?jǐn)?shù)與納米粒子在腎臟內(nèi)的含量一致。免疫組化及普魯士藍(lán)染色結(jié)果確定LOX-1、巨噬細(xì)胞及靶向納米探針分布一致。LOX-1陽性細(xì)胞在腎小球內(nèi)分布較多，而腎小管區(qū)則未出現(xiàn)明顯信號改變。同時(shí)，與LOX-1靶向USPIO相比，注射非靶向性USPIO的小鼠腎皮質(zhì)信號改變不明顯。
　　總結(jié):腎皮質(zhì)中上升的LOX-1表達(dá)與DN的發(fā)生及進(jìn)展密切相關(guān)，通過LOX-1靶向USPIO分子成像可檢測到這一改變，并可能為臨床早期診斷DN提供幫助。