

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文檔簡介
1、目的:通過檢測大鼠各器官組織內(nèi)血管細(xì)胞黏附分子-1(vascular cell adhesionmolecule-1,VCAM-1)的含量,探討VCAM-1在過敏性休克大鼠器官中的作用及其表達(dá)規(guī)律;對過敏性休克大鼠器官組織內(nèi)的嗜酸性粒細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù),探討其與VCAM-1表達(dá)的相關(guān)性。
方法:取健康SD大鼠72只,雌雄不限,體重約150g,按如下分組(1)將12只大鼠隨機(jī)分成2組:對照組(1h組)和休克組(休克死亡組),每組6
2、只。將Compound48/80稀釋成濃度為100mg/200mL的注射液,休克組每只大鼠腹腔注射4mL Compound48/80稀釋液,制造過敏性休克大鼠模型。觀察1h內(nèi)的死亡率,1h 未死亡的,在1h時(shí)脫頸椎處死。對照組每只大鼠注射等量的生理鹽水,在注射后1h 脫頸椎處死。迅速提取肺、心、腦、腎、肝、脾、胃、腸組織。(2)將36只大鼠隨機(jī)分成6組:10min對照組、30min對照組、1h對照組、休克10min組、休克30min組和
3、休克死亡組(休克組),每組6只。同上述方法制造過敏性休克動物模型。休克死亡組的在死亡后迅速提取肺組織,其它各組分別在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)將動物脫頸椎處死后再提取肺組織。(3)將24只大鼠隨機(jī)分成4組:對照組、休克組(休克死亡組)、休克后生理鹽水組和休克后抗VCAM-1組,每組6只。生理鹽水和抗VCAM-1均在休克后30min時(shí)注射。在1h 未死亡的,在1h時(shí)脫頸椎處死,迅速提取肺組織。
所提取的器官組織于4%的多聚甲醛中固定,24~
4、48h后制作石蠟切片,以備HE 染色和免疫組化染色,觀察和檢測(1)過敏性休克大鼠肺、心、腦、腎、肝、脾、胃、腸中嗜酸性粒細(xì)胞和VCAM-1的表達(dá);(2)過敏性休克不同時(shí)間(休克10min、30min和死亡時(shí))大鼠肺內(nèi)嗜酸性粒細(xì)胞和VCAM-1的表達(dá);(3)在誘導(dǎo)大鼠過敏性休克后用抗VCAM-1干預(yù)時(shí)大鼠肺內(nèi)嗜酸性粒細(xì)胞和VCAM-1的表達(dá)。用BI-2000圖像分析軟件對圖像進(jìn)行分析,用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。
5、r> 結(jié)果:(1)在過敏性休克大鼠死亡時(shí),肺內(nèi)VCAM-1的表達(dá)與對照組相比顯著增多,心、腦器官次之,其余器官沒有明顯差異。(2)大鼠過敏性休克不同時(shí)期,如休克10min、30min、休克死亡時(shí),其肺內(nèi)的VCAM-1表達(dá)與對照組相比明顯增加;而且隨著休克時(shí)間延長,VCAM-1表達(dá)有增多趨勢。(3)與對照組相比,休克組、休克后生理鹽水組及休克后抗VCAM-1組肺內(nèi)的VCAM-1表達(dá)明顯增加(P<0.05),而與休克組相比,休克后抗V
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