銀翹藥對的藥理學基礎(chǔ)研究.pdf

1、目的:
　　 采用乙醇加熱回流提取制備出金銀花單提、連翹單提、混合提取、單提合并共四種注射液。以高效液相色譜儀分析四種注射液中主要成分綠原酸、咖啡酸和連翹苷含量,應用在體和離體試驗比較藥效學差異,并通過建立高效液相色譜法對綠原酸和連翹苷在家兔體內(nèi)的藥動學過程進行研究,以評價金銀花、連翹藥對混提注射液、單提合并注射液及單提注射液的藥效與藥動學差異,從而為合理使用銀翹藥對提供理論依據(jù)。
　　 方法:
　　 1.以10

2、倍體積量,75％乙醇,提取3次,每次0.5h作為金銀花、連翹提取工藝,制備得金銀花單提(A組)、連翹單提(D組)、混合提取(B組)、單提合并(C組)4種注射液。
　　 2.建立銀翹藥對中主要成分綠原酸、咖啡酸、連翹苷的HPLC含量測定方法。
　　 3.采用試管二倍稀釋法測定四種注射液對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、無乳鏈球菌、停乳鏈球菌的MIC和MBC值。
　　 4.制造二甲苯致健康小鼠非特異性炎癥模型,比較4種注射

3、液的抗炎效果差異。
　　 5.建立血液中綠原酸、連翹苷的HPLC分析方法,并測定4種注射液中綠原酸、連翹苷兩種主要成分在家兔體內(nèi)不同時間點的血藥濃度,藥時數(shù)據(jù)通過MCPKP藥動學軟件分析,計算藥代動力學參數(shù)。
　　 結(jié)果:
　　 1.制備得到4種注射液,A組中綠原酸含量為4.295 mg·ml-1,B組中綠原酸、連翹苷含量分別為4.862 mg·ml-1、3.10 mg·ml-1,C組中綠原酸、連翹苷含量分別為4

4、.269 mg·ml-1、2.40mg·ml-1,D組中連翹苷含量為2.307 mg·ml-1。
　　 2.綠原酸、咖啡酸和連翹苷分別在下列范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性:0.076～1.52μg(r=0.9998)、0.012～0.23μg(r=0.9999)和0.04～0.86μg(r=0.9999),平均加樣回收率分別為99.41％(RSD1.52％)、102.91％(RSD2.67％)和101.06％(RSD2.45％)。4種注射

5、液中三種成分含量比較結(jié)果為,綠原酸:B>A>C;連翹苷:B>C>D,咖啡酸:B>C>D。
　　 3.體外抑菌試驗結(jié)果,A、D、C、B4種注射液對金黃色葡萄球菌的MIC為70g·l-1、70.3g·l-1、21.8g·l-1、21.8g·l-1,MBC為70g·l-1、70.3g·l-1、21.8g·l-1、21.8g·l-1；對大腸桿菌的MIC為140g·l-1、281.3g·l-1、87.5g·l-1、87.5g·l-1,MB

6、C為140g·l-1、281.3g·l-1、175g·l-1、87.5g·l-1；對無乳鏈球菌的MIC為70g·l-1、140.6g·l-1、175g·l-1、87.5g·l-1,MBC為140g·l-1、281.3g·l-1、175g·l-1、175g·l-1；對停乳鏈球菌的MIC為70g·l-1、140.6g·l-1、87.5g·l-1、87.5g·l-1,MBC為70g·l-1、281.3g·l-1、175g·l-1、175g·l

7、-1?；旌咸崛∨c單一提取合并注射液在抗菌活性上無明顯差異。
　　 4.四種注射液抑制二甲苯所致小鼠耳廓腫脹結(jié)果為:B>C>D>A。
　　 5.健康家兔肌注A、B、C3種注射液后,綠原酸在家兔體內(nèi)的藥動學過程符合一級吸收二室模型,綠原酸的主要藥動學參數(shù)如下,A、B、C3注射液的Cmax分別為1.567±0.211mg·l-1、1.656±0.143mg·l-1、1.612±0.175mg·l-1:Tmax分別為0.413±

8、0.076h、0.224±0.051h、0.285±0.085h;Vd分別為1.895±0.382L·kg-1、1.729±0.413L·kg-1、1.786±0.261L·kg-1；消除半衰期分別為1.164±0.136h、1.227±0.204h、1.132±0.186h；體清除率分別為1.128±0.236L·kg-1.h、0.927±0.113L·kg-1·h、1.010±0.142L·kg-1·h;AUC分別1.905±0.3

9、03 mg·h·L-1、2.623±0.267 mg·h·L-1、2.114±0.312 mg·h·L-1。
　　 健康家兔肌注B、C、D3種注射液后,連翹苷在家兔體內(nèi)的藥動學過程符合一室模型,連翹苷的主要藥動學參數(shù)如下,B、C、D3種注射液的Cmax分別為1.902±0.416mg·L-1、1.858±0.360mg·L-1、1.548±0.231mg·L-1；Tmax分別為0.606±0.172h、0.646±0.116h、

10、0.742±0.110h;Vd分別為0.682±0.158L·kg-1、0.734±0.121 L·kg-1、0.748±0.191L·kg-1；消除半衰期分別為1.212±0.176h、1.220±0.182h、1.272±0.207h;體清除率分別為0.396±0.092L·kg-1·h、0.417±0.130L·kg-1·h、0.425±0.111 L·kg-1·h；AUC分別為3.216±0.542 mg·h·L-1、2.881

11、±0.432 mg·h·L-1、2.80±0.314 mg·h·L-1。
　　 結(jié)論:
　　 1.金銀花、連翹混合提取后,其主要成分綠原酸和連翹苷的溶出率都顯著高于單一提取和單提合并。
　　 2.混合提取與單提合并注射液在抗菌活性上無明顯差異,混提與兩者單提在抑菌上表現(xiàn)為相加作用。
　　 3.在高劑量時,C組注射液與B組注射液抗炎無顯著差異(P>0.05),B組、C組注射液與A組注射液呈現(xiàn)差異極顯著(P<

12、0.01),C組與D組注射液差異不顯著(P>0.05),B組與D組注射液差異顯著(0.010.05)。組間比較時,只有B組與A組注射液差異顯著(0.010.05)。
　　 4.家兔肌注A組、B組、C組注射液后,綠原酸

13、在家兔體內(nèi)的藥動學過程均符合一級吸收二室模型。肌注B、C、D3種注射液后,連翹苷在家兔體內(nèi)的藥動學過程符合一室模型。B、C注射液中綠原酸、連翹苷的Tmax、Lα/2、T1/2ka與單煎相比呈差異顯著性,Tβ/2差異不顯著,表明B、C中綠原酸與連翹苷在注射后能很快的在體內(nèi)吸收分布,達到血峰濃度,兩者對消除半衰期的影響不大。B與C中綠原酸與連翹苷的藥動學參數(shù)差異不顯著。
　　 總之,B與C在體外抑菌、抗炎,家兔體內(nèi)藥動學參數(shù)無顯著性