4-DAMP預(yù)處理對CPB致大鼠腸屏障損傷的保護作用.pdf

1、目的:
　　探討4-DAMP對CPB致大鼠腸屏障損傷的保護作用及其機制。
　　方法:
　　SD雄性大鼠96只，350g～500g，隨機數(shù)字表法分為4組，每組24只，分別為假手術(shù)組(S組)、體外循環(huán)組(C組)、氨甲酰甲膽堿+4-DAMP預(yù)處理組(M組)、4-DAMP預(yù)處理組(D組)。各組10％水合氯醛(0.35ml/100g)麻醉，氣管插管接小動物呼吸機行機械通氣，經(jīng)股動脈、股靜脈、尾動脈和頸靜脈置管;C組麻醉置管后轉(zhuǎn)流

2、建立體外循環(huán)(CPB)模型;M組麻醉置管后氨甲酰甲膽堿6μg/kg+4-DAMP(1.25×10-5)mg/kg股靜脈注射后轉(zhuǎn)流建立CPB模型;D組麻醉置管后4-DAMP(1.25×10-5)mg/kg股靜脈注射后轉(zhuǎn)流建立CPB模型。四組在轉(zhuǎn)流前及預(yù)處理前(T0)、轉(zhuǎn)流即刻(T1)、轉(zhuǎn)流后2小時(T2)、轉(zhuǎn)流后6小時(T3)時間點于頸內(nèi)靜脈采取靜脈血，記錄血流動力學(xué)指標(biāo);ELISA法檢測血清腫瘤壞死因子(TNF-α)、白介素6(IL-6

3、)，D-乳酸、腸脂肪酸結(jié)合蛋白(I-FABP)的含量;采血后放血處死大鼠取腸組織制作病理切片，HE染色觀察各組病理組織學(xué)變化;取下腔靜脈血、腸系膜淋巴結(jié)(MLN)、肝、肺、腎組織進行細菌培養(yǎng)，計算遠隔器官移位頻率;Western blot法檢測腸組織Occludin和ZO-1蛋白表達水平。
　　結(jié)果:
　　1.病理學(xué)組織觀察顯示，S組腸粘膜正常，絨毛高度見，刷狀緣正常。C組和M組可見腸粘膜部分水腫，中性粒細胞和淋巴細胞浸潤，

4、部分絨毛斷裂脫落伴固有層毛細血管充血。D組腸粘膜損傷較C組和M組輕，僅見部分絨毛輕度水腫，腸上皮層和固有層中度分離，只有少許炎性細胞浸潤。
　　2.血清TNF-α和IL-6含量的變化:與S組相比，C組、M組、D組血清TNF-α和IL-6濃度均較S組明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)。D組血清TNF-α和IL-6濃度明顯低于C組和M組，且差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)。M組和C組相比血清TNF-α和IL-6濃度差異無統(tǒng)計學(xué)

5、意義(p＞0.05)。
　　3.血清D-乳酸和I-FABP含量的變化:與S組相比，C組、M組、D組血清D-乳酸和I-FABP濃度均較S組明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)。D組血清D-乳酸和I-FABP濃度明顯低于C組和M組，且差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)。M組和C組相比血清D-乳酸和I-FABP濃度差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05)。
　　4.細菌移位率:與S組相比，C組、M組、D組動物臟器細菌移位率顯著增高，差

6、異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05);與C組和M組相比，D組臟器細菌移位頻率明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05);M組和C組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05)。
　　5.腸粘膜緊密連接蛋白Occludin和ZO-1表達的變化:與S組相比，C組、M組、D組腸組織Occludin和ZO-1蛋白表達降低(p＜0.05);與C組和M組相比，D組腸組織Occludin和ZO-1蛋白表達升高(p＜0.05);與C組相比，M組腸組織Occlud