IL-17基因多態(tài)性和環(huán)境因素與冠心病易感性的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：
　　本研究采用病例-對照研究方法，探討冠心病的發(fā)病的環(huán)境危險因素，以及從分子水平探討IL-17A(rs2275913和rs3819025)和IL-17F(rs3748067)基因多態(tài)性與冠心病易感性的關(guān)系，以及基因和環(huán)境因素之間的交互作用，從而為冠心病發(fā)病的綜合防治提供科學(xué)依據(jù)。
　　方法：
　　本研究采用病例-對照方法開展冠心病發(fā)病相關(guān)危險因素的分析。共納入本院收治的冠心病患者446例作為研究對象，并于同一時

2、期選擇我院健康體檢中心進(jìn)行體檢的健康人群454例作為對照。采用自行設(shè)計的冠心病危險因素調(diào)查表，收集和整理病例組和對照組的一般資料，包括年齡、性別、文化程度等，以及兩組研究對象的病史資料，飲食習(xí)慣等資料;同時采集研究對象的血液樣本進(jìn)行血清脂質(zhì)水平的檢測。抽取每個調(diào)查對象的外周靜脈血5ml，采用乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)進(jìn)行抗凝處理，置于-20℃低溫冰箱中保存待測。將EDTA-K2抗凝采血管采集的調(diào)查對象外周靜脈血5ml取出，按照血

3、液基因組提取試劑盒的操作步驟進(jìn)行血液樣本基因組的提取。
　　L-17A(rs2275913和rs3819025)和IL-17F(rs3748067)基因多態(tài)性的檢測采用polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism(PCR-RFLP)法進(jìn)行。IL-17 rs2275913，r3819025和rs3748067三個位點的等位基因的擴(kuò)增產(chǎn)物分別用Bs

4、tENI限制內(nèi)切酶，MaelⅠ限制內(nèi)切酶和XagⅠ限制內(nèi)切酶進(jìn)行酶切反應(yīng)。酶切反應(yīng)結(jié)束后，將產(chǎn)物取5μl酶切產(chǎn)物與1μl溴酚蘭上樣緩沖液進(jìn)行混勻用于初步分析，置于3％的瓊脂糖凝膠上進(jìn)行電泳，并且在紫外光下觀察酶切產(chǎn)物條帶。將錄入Epidata的數(shù)據(jù)導(dǎo)出為SPSS軟件可用格式，采用SPSS19.0(version19.0，SPSS Inc.，Chicago，IL，USA)進(jìn)行統(tǒng)計分析，所有的統(tǒng)計檢驗均為雙側(cè)檢驗，檢驗水準(zhǔn)取α為0.05。采

5、用單因素和多因素非條件logistic回歸分析環(huán)境危險因素以及IL-17A rs2275913，r3819025和IL-17F rs3748067與冠心病的易感性的相關(guān)關(guān)系。
　　結(jié)果：
　　1.一般資料的比較分析:病例組與對照組在性別、居住地、體重指數(shù)(BMI)、罹患糖尿病病史、鍛煉情況、血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、吸煙和飲酒狀況、奶類及其制品

6、、水果類和咖啡因的攝入量兩組差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　2.單因素logistic回歸分析結(jié)果顯示:在一般資料的分析結(jié)果中，性別OR=2.30，95％CI為1.71-3.10;年齡OR=1.79，95％CI為1.36-2.36;居住地1.39，95％CI為1.06-1.83;BMI指數(shù)3.72，95％CI為2.80-4.95;腰臀比5.32，95％CI為3.94-7.19;糖尿病發(fā)病風(fēng)險的OR=2.10，95％CI為1.51-2.9

7、3;高血壓為2.47，95％CI為1.78-3.44;鍛煉情況則為冠心病發(fā)病風(fēng)險的保護(hù)因素;TC對于冠心病的發(fā)病風(fēng)險OR=1.01，95％CI為1.01-1.02; TG為1.03，95％CI為1.02-1.04; LDL-C為1.01，95％CI為1.01-1.02; HDL-C則為保護(hù)性因素;吸煙對于冠心病的發(fā)病風(fēng)險OR=1.90，95％CI為1.46-2.48;奶類及其制品以及水果的攝入對于冠心病發(fā)現(xiàn)來說均為保護(hù)性因素，二者的OR

8、分別為0.49(95％CI0.24-0.97)，0.44(95％CI0.22-0.87)和0.40(95％CI0.25-0.66)，咖啡因的攝入對于冠心病發(fā)病則為危險因素，OR=2.26，95％CI為1.47-3.47。
　　3.多因素logistic回歸分析結(jié)果:多因素分析結(jié)果與單因素分析結(jié)果類似，但性別與單因素分析結(jié)果相反，表現(xiàn)為女性發(fā)病OR=0.44，95％CI為0.30-0.65;年齡OR=1.94，95％CI為1.34-

9、2.81; BMI指數(shù)為4.45，95％CI為3.07-6.46;腰臀比4.87，95％CI為3.35-7.10;糖尿病發(fā)病風(fēng)險OR=2.08，95％CI為1.32-3.28;高血壓為1.70，95％CI為1.14-2.54; TC為1.02，95％CI為1.01-1.02; TG為1.04，95％CI為1.03-1.05; LDL-C為1.02，95％CI為1.01-1.02; HDL-C為保護(hù)因素，OR=0.89，95％CI為0.8

10、6-0.92;吸煙的患病風(fēng)險為1.90，95％CI為1.46-2.48;吸煙年限1.88，95％CI為1.07-3.28;飲酒年限OR=2.10，95％CI為1.05-4.21;咖啡因攝入為2.61，95％CI為1.47-4.63;水果和谷類的攝入為保護(hù)因素，OR值分別是0.29（95％CI為0.15-0.58），0.46（95％CI為0.25-0.86）。
　　4.IL-17 rs2275913(x2=2.08,P=0.149)

11、和r3819025(x2=0.03,P=0.863)在病例組中的分布符合Hardy-Weinberg平衡定律，但I(xiàn)L-17 rs3748067(x2=35.40，P＜0.001)不符合Hardy-Weinberg平衡定律。在對照組中，IL-17 rs2275913(x2=4.19， P=0.041),r3819025(x2=5.65, P=0.017)和rs3748067(x2=12.52, P=0.001)基因頻率分布不符合Hardy

12、-Weinberg平衡定律。
　　5.攜帶IL-17 rs2275913基因的GG，GA和AA基因型分別有181(40.58％)，200(44.84％)和65(14.57％)例，在對照組中，攜帶IL-17 rs2275913基因的GG, GA和AA基因型分別有210(46.26％)，208(45.81％)和36(7.93％)例。病例組和對照組IL-17 rs2275913基因的GG，GA和AA基因型分布差異有統(tǒng)計學(xué)意義（x2=10

13、.564，P=0.005）。
　　6.在單因素回歸分析發(fā)現(xiàn)，在co-dominant模型中，攜帶IL-17 rs2275913 GA和AA基因型的個體與攜帶GG基因型的個體相比，患冠心病的發(fā)病風(fēng)險分別增加了1.878倍和2.095倍，相應(yīng)的OR(95％CI)位1.878(1.196-2.948)和2.095(1.332-3.296)倍。在recessive模型中，攜帶AA基因型的個體與攜帶GG+GA基因型的個體相比，患冠心病的發(fā)病

14、風(fēng)險增加1.981倍，相應(yīng)的OR(95％CI)為1.260(0.968-1.641)倍。但I(xiàn)L-17r3819025和rs3748067基因多態(tài)性與冠心病的發(fā)病風(fēng)險無相關(guān)關(guān)系。
　　7.多因素回歸分析發(fā)現(xiàn)，攜帶IL-17 rs2275913基因的AA基因型和GA基因型的個體與攜帶GG型的基因型的個體相比，患冠心病的發(fā)病風(fēng)險顯著性的增加2.286倍和2.133倍，相應(yīng)的調(diào)整后的OR(95％CI)位2.286(1.275-4.100)

15、和2.133(1.197-3.799)。在recessive模型中，攜帶IL-17rs2275913AA基因型的個體與攜帶GG+GA基因型相比，患冠心病的發(fā)病風(fēng)險增加了2.204倍，相應(yīng)的OR(95％CI)為2.204(1.270-3.826)。但I(xiàn)L-17 r3819025和rs3748067基因多態(tài)性在co-dominant，dominant和recessive模型中不能增加冠心病的發(fā)病風(fēng)險。
　　8.研究發(fā)現(xiàn)IL-17 rs