神經精神狼瘡靶抗原alpha-internexin捕獲及其自身抗體致病機理.pdf

1、神經精神性狼瘡(neuropsychiatric systemic lupuserythematosus,NPSLE)是系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)常見而且嚴重的靶器官合并癥,其臨床表現(xiàn)復雜多樣,重癥NPSLE可直接危及患者生命或致殘,是SLE研究的重點和難點。1999年美國風濕病學院(ACR)公布了NPSLE的19種臨床分類遍及了中樞神經、周圍神經和自主神經系統(tǒng),其中,認知障礙包括記憶缺失往往同時伴隨于各種NPSLE類型,或者作為NPSL

2、E一個獨立的臨床表型出現(xiàn),具有一定的代表性。
　　 作為系統(tǒng)性自身免疫病的原型,SLE的自身抗體作為生物標記和致病因子一直是研究熱點之一。在NPSLE中已經提示存在多種神經組織特異性/或非特異性的自身抗體,部分可能通過與神經組織抗原直接作用或間接交叉反應介導了神經系統(tǒng)的免疫損傷。本研究旨在通過蛋白質組學方法捕獲NPSLE新的靶抗原,并揭示其自身抗體在NPSLE可能的致病機制。獲得結果如下:
　　 1)應用雙向電泳蛋白質分

3、離技術結合免疫印跡,和基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜(MALDI TOF MS),鑒定和確認了一種神經元中間絲蛋白alpha-internexin(INA)為NPSLE新的靶抗原；
　　 2)應用分子克隆獲得重組純化的INA蛋白并制備高效價多抗,以此建立了抗INA抗體檢測方法。通過對NPSLE及多個對照組的血清/腦脊液抗INA自身抗體檢測的群體驗證,證實了在～50％的NPSLE患者血清和腦脊液中存在抗INA自身抗體；且該抗體的

4、滴度與認知功能障礙和病情活動性相關；
　　 3)進一步建立動物模型,C57小鼠主動免疫INA+LPS處理后,出現(xiàn)明顯的認知障礙,行為學表現(xiàn)和NPSLE相似,腦組織病理學提示了抗體介導的皮層和海馬神經元凋亡；
　　 4)體外實驗證實了抗INA抗體在大鼠胚胎原代神經元培養(yǎng)中抑制了神經元突起的生長,并進一步介導了神經元的凋亡。
　　 結論:本研究首次發(fā)現(xiàn)并確證了NPSLE患者存在抗中間絲蛋白INA的自身抗體,并通過一系