小枝玫瑰的活性篩選與成分含量測定.pdf

1、目的:優(yōu)選小枝玫瑰總黃酮的最佳提取工藝。測定維藥小枝玫瑰花中沒食子酸、槲皮素、木犀草素的含量。觀察小枝玫瑰提取物對Ⅰ型糖尿病小鼠血糖及糖耐量的影響。觀察其在降低高血糖、高血脂等方面的作用，以期為小枝玫瑰綜合利用和產(chǎn)品開發(fā)提供參考。
　　方法:1在單因素試驗基礎上，采用L9(34)正交試驗考察體積分數(shù)、料液比、提取時間3個因素對提取的影響，優(yōu)選小枝玫瑰總黃酮最佳提取工藝。2采用反相高效液相色譜法測定沒食子酸、槲皮素、木犀草素的含量，

2、色譜柱為C18（250mm×4.6mm，5μm），流動相分別為:甲醇-0.3％磷酸(6∶94)、甲醇-0.2％磷酸(63∶37)、甲醇-0.2％磷酸(50∶50);檢測波長分別:為272nm、370nm、350nm;3通過急性毒性實驗研究，測定小枝玫瑰的最大耐受量MTD，兩周內每天觀察并記錄小鼠體征變化及生理反應。4通過采用鏈脲佐菌素(STZ)、四氧嘧啶所致糖尿病模型小鼠，血糖試紙法測定血糖，觀察小枝玫瑰提取物對糖尿病小鼠（Ⅰ、Ⅱ型）血

3、糖的影響，同時進行葡萄糖耐量實驗(OGTT)，觀察玫瑰提取物對糖尿病小鼠糖耐量的改善作用。5通過喂養(yǎng)高脂飼料建立高脂血癥大鼠模型，確定小枝玫瑰提取物對實驗性高血脂大鼠的降血脂作用。
　　結果:1.得到小枝玫瑰總黃酮最佳提取工藝條件為A2B3C1，即用50％的乙醇，以1∶16的料液比加熱回流30min。小枝玫瑰總黃酮提取量平均值為66.60mg/g。2.沒食子酸質量濃度在5.05～101μg/ml范圍內峰面積線性關系良好(r=0.9

4、999)回歸方程為:Y=32582.34X+16156.67，平均回收率為100.15％，RSD為1.39％，小枝玫瑰花中沒食子酸含量為4.9173mg/g;槲皮素進樣量在0.0804～0.402μg范圍內呈良好的線性關系，回歸方程為:Y=541.62X-1.146，r=0.9999，平均回收率為99.70％，RSD為1.27％，小枝玫瑰花中槲皮素含量為0.2598mg/g;木犀草素在進樣量0.1632～0.816μg范圍內呈良好的線性

5、關系，回歸方程為:Y=7090981.62X-37746.20，r=0.9999，平均回收率為101.45％，RSD為1.71％，小枝玫瑰花中木犀草素含量為0.0884mg/g;3.小鼠急性毒性實驗測出小枝玫瑰醇提物的最大耐受量MTD為3.12g（生藥）/kg。4.各組小枝玫瑰提取物均能降低糖尿病小鼠血糖含量，且呈一定量效關系，醇提物和水提物均以大劑量效果為好，在所有提取物中以醇提物大劑量效果最好，但效果不及陽性對照藥物鹽酸二甲雙胍組。

6、小枝玫瑰提取物均能改善其糖耐量。5.通過建立高血脂模型，確定小枝玫瑰醇提物高、中、低劑量組組(686.32 mg/kg、343.16 mg/kg、171.56mg/kg)均可使大鼠血清中TC、TG、LDL-C水平下降，HDL-C水平顯著性升高，具有降血脂作用。
　　結論:1.本課題首次對維吾爾特色藥材小枝玫瑰玫瑰花中總黃酮提取工藝進行優(yōu)選，得到了最優(yōu)的提取工藝。2.高效液相色譜法方法簡便，準確，重復性好，可用測定小枝玫瑰花中沒食子