利用小孢子培養(yǎng)技術培育甘藍型春油菜細胞質雄性不育恢復系的研究.pdf

1、本試驗選用春性甘藍型油菜品種（系）（Brassica napus）和雜種F1代材料，分別在2005年和2006年種植于青海省農林科學院試驗田，進行小孢子培養(yǎng)，主要進行以下幾方面的研究：
　　1.不同材料的出胚率及成苗率：2005年8份材料（基因型）中有7份出胚，不同材料平均每蕾產胚量在0-8.67個之間，其中，2002（北山繁）×46號和14號×四達產胚率最高分別達到8.67和8.36個/蕾；2006年22份材料（基因型）中有21

2、份出胚，其中40.91％的材料每蕾出胚數(shù)在5以上，31.82%的材料每蕾出胚數(shù)在10以上，并且不同材料間出胚率差異很大，平均每蕾產胚量在0-36.94個之間，這說明小孢子成胚明顯受基因型的影響。不同材料（基因型）間小孢子胚的成苗率差異也很大，2005年7份材料中成苗率在2.07%-25.4%之間，其中14號×四達和2002（北山繁）×46號成苗率最高分別為：25.4%和19.23%；2006年出胚的21份材料中，成苗率差異也較大，在0-

3、23.46%之間。
　　2.取材部位對出胚的影響：主枝的每蕾產胚數(shù)大部分都高于其分枝。
　　3.播種時間對出胚的影響：推遲播種時期會降低小孢子的產胚率。
　　4.雜種F1代與其親本的產胚率差異：雜種F1代的出胚率絕大部分都高于其親本。
　　5.低溫冷處理對小孢子胚成苗率的影響：低溫處理能提高胚狀體的成苗率，并且，處理時間越長，胚狀體的成苗率越高。其中，1465（R）×2206和1759（R）×2239兩個材料低溫

4、處理80天（以無低溫處理作為對照），其成苗率分別達到：46.67%和57.89%。
　　6.秋水仙堿不同處理加倍效果的比較：秋水仙堿泡根不同處理中以0.6 g/L濃度，處理5.0 h和3.4g/L濃度，處理1.5h，植株成活率和加倍率最高。
　　7.DH系的自交結實指數(shù)與花粉活力的關系：經(jīng)秋水仙堿加倍后可育的植株大部分花粉活力較高，結實指數(shù)較高；而半可育的植株花粉活力低，并有50%的植株結實指數(shù)低于1。
　　8.DH系

5、的芥酸、硫甙的測定：對小孢子培養(yǎng)得到的DH系進行品質分析，所選39個材料的芥酸均低于1%，其中芥酸含量低于對照品種青雜2號的有29個，占所有材料的74.36%。硫甙含量低于30μmol/g的材料有18個，低于25μmol/g的材料有9個，低于20μmol/g的材料有1個，低于對照品種青雜2號的有13個。
　　9.恢復度的測定：以3個不育系（1289，2168，2235）做為母本，10個DH系（E-2、E-3、E-4、E-5、E-6

6、、E-10、E-12、E-15、E-16、E-17）作為父本雜交，測 F1代恢復度，發(fā)現(xiàn)：30個組合中有14組恢復株率達到100%，其余組合有不育株產生。
　　10．配合力的測定：經(jīng)小孢子培養(yǎng)獲得的10個恢復系與3個不育系雜交F1代中，產量排名前五位的組合1289×E-10、2235×E-10、2235×E-15、1289×E-3、2235×E-5其父本 E-10、E-15、E-3、E-5的一般配合力相對效應值均較高，并且組合間的