甘藍(lán)型油菜波利馬細(xì)胞質(zhì)雄性不育育性恢復(fù)基因Rfp的圖譜定位.pdf

1、雜種優(yōu)勢利用是提高油菜產(chǎn)量的一條有效途徑,它可以有效解決產(chǎn)量與品質(zhì)、產(chǎn)量與抗逆性間的矛盾,增強(qiáng)油菜品種的適應(yīng)性。波里馬細(xì)胞質(zhì)雄性不育(Pol CMS)是油菜雜種優(yōu)勢利用的一條重要途徑,已被廣泛應(yīng)用于雜交種的選育,培育優(yōu)良的恢復(fù)系已成為應(yīng)用該CMS進(jìn)行雜交種選育的一個重要方面。與育性恢復(fù)基因連鎖的分子標(biāo)記有助于在育種的早期鑒定植株是否含有目的基因,可以加速優(yōu)良恢復(fù)系的培育過程；另外,大量的與恢復(fù)基因緊密連鎖的分子標(biāo)記是圖位克隆該基因不可缺

2、少的。所以,本研究的目的是對Pol CMS的育性恢復(fù)基因(Rfp)進(jìn)行圖譜定位,以期為恢復(fù)系的遺傳改良和雜種純度鑒定提供輔助手段,并為進(jìn)一步分離、克隆Rfp奠定基礎(chǔ)。主要獲得了以下結(jié)果:
　　 1.在已回交多代的近等基因系中,繼續(xù)選擇可育單株(Rfprfp)與輪回親本吳108(rfprfp)雜交,獲得回交育性分離群體,其中可育株125株,不育株為113株,卡平方檢驗符合1:1的理論分離比。
　　 2.采用分離群體集團(tuán)混合

3、分析法(BSA)法篩選了3072對AFLP引物,找到了與Rfp連鎖的AFLP標(biāo)記24個,用其中9個連鎖較緊密的標(biāo)記繪制了區(qū)域遺傳連鎖圖,最近的標(biāo)記距目標(biāo)位點(diǎn)為0.4 cM。
　　 3.把2個距目標(biāo)位點(diǎn)最近的AFLP標(biāo)記(ZQA和ZQH)轉(zhuǎn)化成了較穩(wěn)定的易在育種中應(yīng)用的SCAR標(biāo)記(SCAP0612ST和SCAP0612EM2),并在更大群體和不同來源的恢復(fù)系材料中進(jìn)行驗證,發(fā)現(xiàn)標(biāo)記SCAP0612ST與目標(biāo)位點(diǎn)連鎖最緊密,且適用

4、性更為廣泛,可以利用于雜種純度鑒定和標(biāo)記輔助選擇。
　　 4.將上述兩個標(biāo)記片段序列遞交到美國國家生物技術(shù)信息中心(National Center forBiotechnology Information,NCBI)網(wǎng)站http://www.ncbi.nlm.nih:gov/BLAST對標(biāo)記片段與擬南芥進(jìn)行同源性比對。發(fā)現(xiàn)兩個標(biāo)記片段均能夠在擬南芥中搜索到同源序列,其同源性分別為87％和91％,這些同源序列都分布在擬南芥第一染色