sTNFRⅡ-gAD融合蛋白聚合體表達(dá)、制備及生物學(xué)特性研究.pdf

1、溫州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文sTNFRⅡgAD融合蛋白聚合體表達(dá)、制備及生物學(xué)特性研究姓名：陸月申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：遺傳學(xué)指導(dǎo)教師：高基民；吳小兵201105溫州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文程度是二聚體融合蛋白的24倍。結(jié)論成功構(gòu)建了pDC316sTNFRIIgAD和pRECIRESDHFRsTNFRII—gAD融合基因質(zhì)粒，并分別對應(yīng)在腺病毒表達(dá)系統(tǒng)及CHO／dhfr’真核細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)中實(shí)現(xiàn)了有生物學(xué)活性的融合蛋白的表達(dá)?！⒘吮容^完善的蛋白純

2、化系統(tǒng)。從收獲細(xì)胞培養(yǎng)上清開始，經(jīng)過硫酸銨沉淀，金屬離子親和層析純化，分子篩純化得到相對高純度，高質(zhì)量的sTNFRIIgAD融合蛋白。并完善了檢測手段，通過蛋白點(diǎn)雜交，Westemblotting免疫印跡實(shí)驗(yàn)，L929細(xì)胞測活實(shí)驗(yàn)等，檢測了融合蛋白的表達(dá)情況和比活性。研究了三聚體重組蛋白sTNFRIIgAD的一些生物學(xué)特性，通過超速分析離心得到三聚體融合蛋白的分子量為165kD，通過biacore實(shí)驗(yàn)證明三聚體重組蛋白sTNFRIIgA