艾滋病脾腎陽虛證特異性mRNA表達(dá)的研究.pdf

1、目的:
　　對前期基因芯片技術(shù)篩選出的艾滋病脾腎陽虛證潛在mRNA表達(dá)進行臨床驗證，以確定艾滋病脾腎陽虛證特異性mRNA表達(dá)，為艾滋病中醫(yī)證候診斷提供客觀化依據(jù)。
　　方法:
　　本研究選取前期基因芯片篩選結(jié)果中艾滋病期脾腎陽虛證與正常對照組比較具有顯著差異的目的mRNA10條，分別為：MAP2K7、IFIT1、MAPK14、NLRP6、DOCK4、ABCC2、CXCL9、TBXA2R、STYK1、KIR2DL4，采用

2、實時熒光定量PCR（Quantitative Real-time PCR，qRT-PCR）技術(shù)對納入的艾滋病期脾腎陽虛證患者、無癥狀期脾腎陽虛證患者和健康志愿者的標(biāo)本進行上述10條目的mRNA表達(dá)量的檢測，以GAPDH作為內(nèi)參基因進行對比，目的mRNA的相對表達(dá)量用2-△CT值來表示。通過SPSS V20.0統(tǒng)計軟件分析目的mRNA在艾滋病期、無癥狀期脾腎陽虛證組與正常對照組之間的差異表達(dá)，以及艾滋病期脾腎陽虛證組及無癥狀期脾腎陽虛證組

3、之間目的mRNA差異表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1.艾滋病期脾腎陽虛證組與正常對照組比較：NLRP6在艾滋病期脾腎陽虛證組表達(dá)下調(diào)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），與芯片篩選結(jié)果一致；MA P2K7、KIR2DL4在艾滋病期脾腎陽虛證組表達(dá)上調(diào)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），與芯片篩選結(jié)果相一致；TBXA2R在艾滋病期脾腎陽虛證組表達(dá)上調(diào)，與芯片篩選結(jié)果一致，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；CXCL9在艾滋病期脾腎陽虛

4、證組表達(dá)上調(diào)，與芯片篩選結(jié)果不一致，但差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；ABCC2在艾滋病期脾腎陽虛證組表達(dá)下調(diào)，與芯片篩選結(jié)果一致，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。IFIT1、DOCK4、STYK1、MAPK14這4條mRNA在艾滋病期脾腎陽虛證組表達(dá)上調(diào)與基因芯片篩選結(jié)果表達(dá)下調(diào)不相吻合，且差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
　　2.無癥狀期脾腎陽虛證組與正常對照組比較：NLRP6、ABCC2在無癥狀期脾腎陽虛組表達(dá)下調(diào)，

5、差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），與芯片篩選結(jié)果一致。MAP2K7、KIR2DL4在無癥狀期脾腎陽虛證組表達(dá)上調(diào)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），與芯片篩選結(jié)果一致；TBXA2R在無癥狀期脾腎陽虛證組表達(dá)上調(diào)，與芯片篩選結(jié)果一致，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。CXCL9在無癥狀期脾腎陽虛證組表達(dá)上調(diào)，與基因芯片篩選結(jié)果不一致，但差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；DOCK4、MAPK14、STYK1、IFIT1這4條mRNA在無癥

6、狀期脾腎陽虛證組表達(dá)上調(diào)與基因芯片篩選結(jié)果表達(dá)下調(diào)不相吻合，且差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
　　3.艾滋病期脾腎陽虛證組和無癥狀期脾腎陽虛證組比較：MAP2K7的表達(dá)在兩組之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），其余9條mRNA的表達(dá)在兩組之間無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.本研究得出艾滋病脾腎陽虛證的特異性mRNA為KIR2DL4、NLRP6、MAP2K7，其中MAP2K7可以作為無癥狀期向艾