艾滋病熱毒蘊結證特異性mRNA表達的研究.pdf

1、目的：
　　探討艾滋病熱毒蘊結證與差異mRNA表達的相關性，以期發(fā)現艾滋病熱毒蘊結證的特異性表達mRNAs，探索其形成的分子生物學本質，為艾滋病中醫(yī)證候診斷的客觀化提供實驗依據。
　　方法：
　　本研究在前期芯片篩選的結果中通過查閱相關文獻及數據分析選取艾滋病熱毒蘊結證差異基因10條。10條基因是：CHP1、APOBEC3F、CDA、GGT1、CHI3L1、ZEB1、KLF10、ATAD1、SP3、IL7R。運用實時熒

2、光定量PCR技術（Quantitative Real-time PCR，qRT-PCR）對采集的艾滋病期熱毒蘊結證、無癥狀期熱毒蘊結證及正常對照組的血液標本進行上述目的mRNA的mRNA表達量檢測，以GAPDH作為內參基因進行標準化，對目的基因的2-△CT值來表示其相對表達量。運用SPSS V20.0統(tǒng)計軟件分析目的mRNA在艾滋病期組、無癥狀期組和正常對照組之間的的差異表達關系。
　　結果：
　　1）艾滋病期組與正常對照組

3、比較：CHI3L1、CDA、APOBEC3F在艾滋病期熱熱毒蘊結證患者中表達下調，且差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），與芯片篩選結果相一致；CHP1、GGT1、ZEB1、KLF10、ATAD1等基因雖表達下調與芯片篩選結果一致，但差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。SP3、IL7R無統(tǒng)計學差異，表達上下調也與芯片結果不一致。
　　2）無癥狀期組與正常對照組比較：CHP1、APOBEC3F、CDA、GGT1在艾滋病期熱熱毒蘊結證患者中

4、表達下調，且差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），與芯片篩選結果相一致；CHI3L1、ZEB1、KLF10、ATAD1等基因雖表達下調與芯片篩選結果一致，但差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。SP3、IL7R無統(tǒng)計學差異，表達上下調也與芯片結果不一致。
　　3）艾滋病期組與無癥狀期組比較：CHI3L1在艾滋病期與無癥狀期均表達下調，且兩組間差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；CDA、APOBEC3F、CHP1、GGT1、ZEB1、KLF

5、10、ATAD1、SP3、IL7R等基因在艾滋病期與無癥狀期均表達下調，但兩組間差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。
　　結論:
　　1.艾滋病期熱毒蘊結證和無癥狀期熱毒蘊結證的特異性表達mRNA存在差異，在艾滋病期熱毒蘊結證中的特異性表達mRNA是：CHI3L1，主要涉及Th1/Th2反應、炎性細胞活化與凋亡、新生血管生成、組織修復與重塑等功能可能是艾滋病期熱毒蘊結證的形成的生物學本質；在無癥狀期熱毒蘊結證的特異性表達mRN

6、A是：CHP1、GGT1，主要涉及細胞的生長和凋亡、炎癥調節(jié)、氧化應激反應、抑制腫瘤細胞的生長等功能，這可能是導致無癥狀期熱毒蘊結證形成的生物學本質。
　　2.艾滋病期熱毒蘊結證和無癥狀期熱毒蘊結證亦具有共同的特異性表達mRNA：CDA、APOBEC3F，這兩個基因在上述兩期中的表達無顯著差異，提示這兩條基因與艾滋病分期無關，與艾滋病熱毒蘊結證有關。上述基因的作用主要涉及胞苷脫氫反應、抑制HIV的復制等，可能在艾滋病的病理生理過程