tPA乳腺特異性表達載體的構建及其瞬時表達.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、該研究中,首先將克隆的乳清酸蛋白基因(WAP)2.4kb啟動子插入pBluescript質粒,構建質粒pW;然后將克隆的0.37kb加poly A信號插入WAP啟動子的下游,構建可指導外源基因在乳腺特異性表達的載體pWA;最后將克隆的目的基因2.1kb tPA cDNA連接于WAP啟動子和加poly A信號之間,構建tPA乳腺特異性表達載體pWTA.構建成功的pWTA表達載體通過脂質轉染胺試劑Lipofectamine<'TM2000>

2、轉染乳腺癌細胞系,通過體外注射轉移至妊娠期小鼠乳腺,以原位雜交技術檢測tPA在乳腺癌細胞系和泌乳期小鼠乳腺中的瞬時表達,驗證pWTA表達載體的表達能力.結論:1.成功克隆了WAP啟動子,并構建了乳腺特異性表達載體pWA.2.成功克隆了tPA基因,并構建了tPA乳腺特異性表達載體pWTA.3.載體pWTA可在人乳腺癌細胞和泌乳期小鼠乳腺特異性表達,為乳腺特異性表達載體.4.該研究構建的tPA乳腺特異性表達載體pWTA,解決了建立乳腺生物反

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