CYP2C19基因多態(tài)性、血小板中微小RNA～26a的表達(dá)水平與PCI患者術(shù)后氯吡格雷抵抗的關(guān)系及不同藥物聯(lián)用方式干預(yù)的治療效果.pdf

1、本文主要從以下幾個部分展開論述：
　　第一部分：
　　CYP2C19基因多態(tài)性對冠心病患者PCI術(shù)后氯吡格雷抵抗患者血小板抑制率、MA～ADP及血小板活化指標(biāo)的影響
　　目的:
　　本研究通過檢測PCI術(shù)患者基因CYP2C19的多態(tài)性及服用氯吡格雷后血小板的抑制率、MA-ADP（血凝塊的最大強(qiáng)度）及血小板活化指標(biāo)的變化，分析CYP2C19基因多態(tài)性與氯吡格雷抵抗的關(guān)聯(lián)。
　　方法:
　　選取312例于

2、2012年6月至2013年12月陸續(xù)在河北省人民醫(yī)院心內(nèi)科住院的并行PCI術(shù)治療的冠心病患者作為研究對象。采用Taqman～realtime PCR的方法檢測所有患者CYP2C19基因型。同時采用血彈力圖儀檢測血小板的抑制率、MA～ADP，流式細(xì)胞儀檢測血小板活化指標(biāo)VASP、sCD40及P～選擇的水平。數(shù)據(jù)均采用SPSS13.0進(jìn)行統(tǒng)計分析。
　　結(jié)果:
　　1.研究對象的一般特征及臨床特征
　　本研究共有312例行

3、PCI術(shù)治療的冠心病患者，年齡在39～78歲之間，平均年齡(58.67±10.34)歲，其中男性203例，女性109例。
　　2.CYP2C19基因檢測結(jié)果
　　3.12例患者中，CYP2C19*1/*1患者135例，CYP2C19*1/*2患者124例，CYP2C19*1/*3患者22例， CYP2C19*2/*2患者23例，CYP2C19*2/*3患者6例，CYP2C19*3/*3患者2。CYP2C19*1的頻率為66.

4、7％，CYP2C19*2的頻率為28.2％，CYP2C19*3的頻率為5.1％根據(jù)基因型分布，可將312例患者分為正?；蛐?CYP2C19*1/*1)組135例，失功能基因型(CYP2C19*1/*2、*1/*3、*2/*2、*2/*3、*3/*3)組177例。
　　結(jié)論:
　　CYP2C19基因多態(tài)性影響血小板抑制率、MA～ADP及血小板活化指標(biāo)(VASP、sCD40和P～選擇素)的水平，且CYP2C19失功能基因型與氯

5、吡格雷抵有關(guān)。
　　第二部分：CYP2C19基因多態(tài)性與冠心病患者PCI術(shù)后心血管事件發(fā)生的相關(guān)性研究
　　目的:
　　探討CYP2C19功能缺失基因與行PCI術(shù)后冠心病患者服用氯吡格雷治療后心血管事件發(fā)生情況的關(guān)聯(lián)性。
　　方法:
　　對2012年6月至2013年12月河北省人民醫(yī)院收治的冠心病患者312例行PCI術(shù)治療后進(jìn)行隨訪研究。采用Taqman～realtime PCR的方法檢測所有患者CYP2C

6、19*2位點和*3位點的基因型。根據(jù)CYP2C19基因型不同，將患者分為3組，即快代謝型、中間代謝型和慢代謝型。通過門診問診、電話訪談以及入院記錄查詢的方式對患者進(jìn)行隨訪。觀察對比三組患者1年內(nèi)主要不良心血管事件的發(fā)生情況的異同，分析CYP2C19 CYP2C19*2或*3位點基因多態(tài)性與主要不良心血管事件之間的關(guān)系。
　　結(jié)果:
　　1.275例受訪成功的患者中，CYP2C19*1/*1患者122例，CYP2C19*1/*

7、2患者112例，CYP2C19*1/*3患者18例，CYP2C19*2/*2患者19例，CYP2C19*2/*3患者4例。CYP2C19*1、CYP2C19*2、CYP2C19*3的頻率分別為68.0％、28.0％、4.0％。根據(jù)CYP2C19*2及*3位點基因型分布，將患者分為正常代謝型組、中間代謝型組、慢代謝型組，分別有患者122例、130例和23例。
　　2.三組患者M(jìn)ACE復(fù)合終點事件的發(fā)生率分別為10.6％、16.1％和

8、47.8％(P＜0.001)。同時，CYP2C19*2或*3突變基因型攜帶者較CYP2C19*1/*1攜帶者的主要不良心血管事件的發(fā)生率高(P＜0.001)。而且CYP2C19*2或*3突變基因攜帶者的復(fù)合終點事件發(fā)生率(20.9％)明顯高于CYP2C19*1/*1攜帶者(10.6％)。
　　采用Logistic回歸分析主要不良心血管事件發(fā)生的相關(guān)因素，發(fā)現(xiàn)CYP2C19基因多態(tài)性（OR=2.817，95％CI:1.282～6.6

9、57; P＜0.01）是發(fā)生主要不良心血管事件的獨立預(yù)測因素。
　　結(jié)論:
　　CYP2C19*2或*3功能缺失等位基因攜帶者M(jìn)ACE的發(fā)生率較高，CYP2C19基因多態(tài)性與臨床預(yù)后相關(guān)。
　　第三部分：PCI術(shù)后患者血小板中微小RNA～26a的表達(dá)水平與氯吡格雷抵抗的關(guān)系
　　目的:
　　評價血小板中微小RNA～26a的表達(dá)水平與冠脈支架術(shù)后患者氯吡格雷抵抗的關(guān)系。
　　方法:
　　選取201

10、3年1月至2014年1月于河北省人民醫(yī)院住院的43例行PCI的冠心病患者作為研究對象。同時選取20名無心血管疾病史的志愿者作為對照。采用流式細(xì)胞儀檢測血管擴(kuò)張刺激磷蛋白(VASP)的水平計算血小板反應(yīng)指數(shù)（PRI）。將PRI≥50％定義為氯吡格雷低反應(yīng)性采用Western blotting檢測VASP蛋白的表達(dá)。采用實時定量PCR檢測mRNA和miRNAs的表達(dá)水平。采用新生物信息學(xué)工具預(yù)測miR～26a、miR～199和miR～23a

11、是否定向作用于VASP。
　　結(jié)果:
　　氯吡格雷低反應(yīng)性患者的血小板活性高于健康人群。血VASP基因轉(zhuǎn)錄水平在健康人群和氯吡格雷高反應(yīng)性患者中均維持在相對低的水平，但在氯吡格雷低反應(yīng)性患者中水平相對較高。血小板miR～26a的表達(dá)與血小板高反應(yīng)活性相關(guān)而miR～199和miR～23a均與之不相關(guān)。血清中的miR～26a，miR～199和miR～23a均不參與氯吡格雷抵抗。
　　結(jié)論:
　　血小板miR～26a在

12、氯吡格雷抵抗中起重要作用。mRNA和VASP PRI檢測將有助于早期診斷和預(yù)測氯吡格雷抵抗。
　　第四部分：雙倍氯吡格雷、氯吡格雷聯(lián)用通心絡(luò)、替格瑞洛對CYP2C19*2基因突變患者PCI術(shù)后影響
　　目的:
　　探討CYP2C19*2基因功能缺失型的氯吡格雷低反應(yīng)的PCI患者經(jīng)氯吡格雷加量、氯吡格雷聯(lián)用通心絡(luò)或更換為替格瑞洛治療后血小板活性的變化及MACE事件的發(fā)生情況，為我國冠心病患者行PCI術(shù)后治療中新型抗血小板

13、藥物的使用提供新的線索。
　　方法:
　　選取458例于2012年6月至2014年10月陸續(xù)在河北省人民醫(yī)院心內(nèi)科住院的并行PCI術(shù)治療的冠心病患者作為研究對象。采用Taqman～realtime PCR的方法檢測所有患者CYP2C19*2位點的基因型，并將其中的CYP2C19*2基因型患者作為隨訪對象。根據(jù)患者PCI術(shù)后對氯吡格雷的反應(yīng)情況將入選的212例患者分為標(biāo)準(zhǔn)抗血小板組46例、氯吡格雷雙倍劑量組50例、氯吡格雷聯(lián)用

14、通心絡(luò)組59例及替格瑞洛組57例，對比分析四組患者在不同隨訪時間的血小板活性的差異及MACE事件的發(fā)生情況。
　　結(jié)果:
　　1.術(shù)后1個月時，氯吡格雷雙倍劑量組、聯(lián)用通心絡(luò)組及替格瑞洛組的血小板抑制率均高于標(biāo)準(zhǔn)抗血小板治療組，且替格瑞洛組＞氯吡格雷雙倍劑量組＞聯(lián)用通心絡(luò)組，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05）。術(shù)后3個月時，聯(lián)用通心絡(luò)組及替格瑞洛組的血小板抑制率均高于標(biāo)準(zhǔn)抗血小板治療組和氯吡格雷雙倍劑量組（均P＜0.05

15、），標(biāo)準(zhǔn)抗血小板治療組＞氯吡格雷雙倍劑量組，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。術(shù)后6個月時，替格瑞洛組的血小板抑制率高于其他三組，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05），而氯吡格雷雙倍劑量組、聯(lián)用通心絡(luò)組低于標(biāo)準(zhǔn)抗血小板治療組(P＜0.05)。術(shù)后12個月時，與6個月時一樣，也是替格瑞洛組的血小板抑制率均高于其他三組，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05），而氯吡格雷雙倍劑量組、聯(lián)用通心絡(luò)組低于標(biāo)準(zhǔn)抗血小板治療組（P＜0.05）。然

16、而，同時發(fā)現(xiàn)雖然替格瑞洛組的患者血小板抑制率一直處于較高水平，但隨著用藥時間的延長，其血小板抑制率仍有所降低且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.001)。給藥后聯(lián)用通心絡(luò)組在3個月時達(dá)最大血小板抑制率，而氯吡格雷雙倍劑量組與替格瑞洛組在第1個月時已達(dá)最大。
　　2.隨訪四組患者12個月后，氯吡格雷雙倍劑量組、氯吡格雷聯(lián)用通心絡(luò)組及替格瑞洛組患者總的不良心血管事件發(fā)生率均低于標(biāo)準(zhǔn)抗血小板組（均P＜0.05），而四組患者單一的不良心血管事件