利眠寧的法醫(yī)毒物動力學(xué)研究.pdf

1、目的：
　　 (1)建立大鼠的利眠寧灌胃的死后分布和死后再分布研究動物模型：建立犬利眠寧灌胃的保存檢材中分解動力學(xué)研究動物模型；
　　 (2)建立生物樣本中利眠寧的GC-NPD及GC/MS的定性定量分析方法；
　　 (3)研究利眠寧的死后分布，死后再分布及保存檢材中的分解動力學(xué)規(guī)律，為利眠寧中毒死亡案件的法醫(yī)學(xué)鑒定提供科學(xué)依據(jù)。
　　 方法：
　　 (l)利眠寧在染毒大鼠體內(nèi)的死后分布研究：大鼠分

2、別按0.5，2和4倍LD50灌胃，于給藥后3.0h處死，即刻解剖，取心、肺、肝、脾、腎、腦、心血、肌肉和睪丸等組織臟器和體液，氣質(zhì)聯(lián)用法定性，氣相色譜法定量檢測其中利眠寧含量。
　　 (2)利眠寧在染毒大鼠體內(nèi)的死后再分布研究：大鼠按0.5倍LD50灌胃，于給藥后3.Oh處死，室溫放置，分別于死后0，2,4，8，12，24,48，72，96h解剖，取心、肺、肝、脾、腎、腦、心血、肌肉和睪丸等組織臟器和體液，氣質(zhì)聯(lián)用法定性，氣相色

3、譜法定量檢測其中利眠寧含量。
　　 (3)利眠寧在保存檢材中分解動力學(xué)研究：犬按4倍LD50灌胃，于給藥后3.Oh處死，死亡后立即取血液和肝臟，血液用檸檬酸三鈉抗凝。血液和肝臟分三等份分別置于200℃、4℃、-20℃環(huán)境中，于第O、lw、3w、Sw、7w、14w、Sm、7m、16m氣質(zhì)聯(lián)用法定性，氣相色譜法定量檢測其中利H民寧含量。
　　 (4)采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件One-Way ANOVA t-test處理實驗

4、數(shù)據(jù)，結(jié)果以(X)±S表示。
　　 結(jié)果：
　　 (1)中毒癥狀：利眠寧低劑量經(jīng)口灌胃之后，主要表現(xiàn)為倦睡，但不引起深度睡眠，易被喚醒，大劑量時可導(dǎo)致昏迷，呼吸、心跳停止等中毒癥狀。
　　 (2)檢測方法：利眠寧的特征離子為282，220，77，Tr=8.88min;心血和肝組織中的回歸方程、線性檢測范圍和最低檢出濃度分別為Y血=0.1656X+0.0463(R2=0.998)、0.5-32μg/mL、O.OIμ

5、g/mL;Y肝=0.1332X-0.0756(R2=0.992)、0.1-32μg/g、0.01μg/g.
　　 (3)死后分布：0.5倍LD50實驗組大鼠體內(nèi)利眠寧的平均含量從高到低依次為：胃、肝、腦、脾、睪丸、腎、腫、肌肉和心臟。2倍LD50實驗組大鼠體內(nèi)利眠寧的平均含量從高到低依次為：胃、肝、肺、脾、心臟、腦、腎、睪丸和肌肉。4倍LD50實驗組大鼠體內(nèi)利眠寧的平均含量從高到低依次為：胃、肝、腦、肺、腎、睪丸、肌肉、脾和心臟

6、。
　　 (4)死后再分布：大鼠按0.5倍LD50給藥3小時后處死，心血中利眠寧濃度在96h內(nèi)整體呈下降趨勢，96h與2h、4h、8h、16h、24h相比均有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)。心臟中72h和96h利眠寧的含量與2h、4h、8h、16h、24h均有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)，心臟中利眠寧的含量整體呈下降趨勢。肝臟16h利眠寧含量升高，之后呈下降趨勢，16h與其他各時間點均有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)。脾臟2h利眠寧含量升

7、高，后隨時間呈下降趨勢。肺臟中利眠寧含量8h達(dá)高峰，與其余時間點有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)，8h后隨時間呈下降趨勢。腎臟24h時利眠寧含量最高，后下降。肌肉中2h含量最高,4h開始下降，8h后濃度基本不變。腦、睪丸和胃中利眠寧含量在死后各時間點含量相對比較穩(wěn)定，均無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。利眠寧可以發(fā)生死后再分布現(xiàn)象。
　　 (5)保存檢測中的分解動力學(xué)：保存血液中利眠寧含量在4℃和-20℃保存時均呈先升高后下降的趨勢，保

8、存21d濃度達(dá)最高，為初始含量的229.7％和162.7％，隨著保存時間延長，濃度逐漸下降，至保存480d下降至初始濃度的15.1％和43.1％：常溫保存血液中利眠寧含量隨著保存時間延長，濃度逐漸下降，至保存480d下降至初始濃度的43.5％。保存溫度對肝組織中利眠寧的含量影響不大，在480d內(nèi)下降比較緩慢，常溫,4℃和-20℃分別下降至初始溫度的48.2％,52.8％和21.2％。
　　 結(jié)論：
　　 (1)本研究采用

9、利眠寧大鼠和犬灌胃，分別建立了利眠寧的死后分布、死后再分布和保存檢材中分解動力學(xué)研究動物模型，所建模型可應(yīng)用于利眠寧中毒或死亡的法醫(yī)學(xué)檢驗和法醫(yī)毒物動力學(xué)研究。
　　 (2)本研究建立了生物檢材中利眠寧的液-液萃取方法和GC、GC/MS定性、定量檢測方法，其提取回收率、線性范圍和檢測靈敏度均達(dá)到生物樣本中毒（藥）物檢驗要求，可應(yīng)用于利眠寧的法醫(yī)學(xué)檢驗和法醫(yī)毒物動力學(xué)研究。
　　 (3)利眠寧在染毒大鼠體內(nèi)的死后分布：利眠

10、寧在體內(nèi)的含量分布趨勢基本與服用劑量無關(guān)，但是由于灌胃劑量較大，在瀕死期由于呼吸深長，發(fā)生嘔吐誤吸入氣管中等因素可導(dǎo)致肺的含量明顯升高，在進(jìn)行鑒定時需要特別注意。
　　 (4)利眠寧在染毒大鼠體內(nèi)的死后再分布：大鼠給藥3小時處死后，組織臟器中利眠寧的含量在96h內(nèi)均有不同程度的變化，其中心血、心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟和肌肉受死后再分布影響較為明顯。腦、睪丸和胃中利眠寧含量在死后各時間點含量相對比較穩(wěn)定，受死后再分布影響不顯著