氯氰菊酯及其代謝物在犬體內(nèi)的毒物動(dòng)力學(xué)研究.pdf

1、目的：
　　1.建立生物檢材中氯氰菊酯及其代謝物的前處理和HPLC-MS-MS（高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜）檢測(cè)方法；
　　2.研究氯氰菊酯及其代謝物在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)的代謝動(dòng)力學(xué)規(guī)律，建立氯氰菊酯的毒物動(dòng)力學(xué)模型、方程和參數(shù)，探討血液、尿液、膽汁中氯氰菊酯的檢出時(shí)限；
　　3.研究氯氰菊酯及其代謝物與服藥時(shí)間之間的關(guān)系，建立氯氰菊酯服藥時(shí)間的推斷方法；
　　方法：
　　1.受試動(dòng)物：6只健康雄性成犬（雜種犬），體重

2、12kg左右，均由山西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。受試動(dòng)物在受試前均未服用過(guò)任何藥物。本研究方案通過(guò)倫理審查（山西醫(yī)科大學(xué)2014087）。
　　2.標(biāo)本采集：6只雄性犬全麻后，行膽囊造瘺術(shù)，接引流袋引流膽汁，待其引流通暢后，禁食12h后經(jīng)口灌胃1/4 LD50氯氰菊酯原藥，分別于灌胃前及灌胃后0.2h、0.5h、1h、3h、4h、8h、12h、24h、48h、72h、96h、120h、144h、168h收集膽汁、血液、尿液，-20

3、℃冰箱保存待檢。
　　3.提取檢測(cè)：生物樣品中添加內(nèi)標(biāo)8ng后采用二氯甲烷液液萃取法提取，HPLC-MS-MS檢測(cè)，MRM方式記錄，保留時(shí)間和定性離子對(duì)定性，內(nèi)標(biāo)法定量。
　　4.數(shù)據(jù)處理方法：WinNonlin藥代動(dòng)力學(xué)軟件；SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，采用方差分析。
　　結(jié)果：
　　1.樣品檢測(cè)：HPLC-MS-MS可同時(shí)定量檢測(cè) CYM（氯氰菊酯）、3-PBA（3-苯氧基苯甲酸）、DCVA（二氯菊酸）。氯氰

4、菊酯的最低檢測(cè)限為0.49ng/mL，線性范圍為0.2-10μg/mL；其代謝物3-PBA、DCVA的最低檢測(cè)限為0.49ng/mL，線性范圍為0.02-4μg/mL；相關(guān)系數(shù) r值均大于0.99， RSD均小于3％，回收率為95.33%-106.6%。
　　2.毒物動(dòng)力學(xué)：經(jīng)口灌胃1/4 LD50氯氰菊酯后，三種檢材中的藥物濃度：原體濃度總體上為血液>尿液>膽汁，3-PBA濃度總體上為尿液>膽汁>血液，DCVA濃度總體上為膽汁>

5、尿液>血液；不同檢材中的藥物濃度：血液和尿液中3-PBA>DCVA>CYM，膽汁中DCVA>3-PBA>CYM。尿液和膽汁中的氯氰菊酯及其代謝物均在1-2小時(shí)達(dá)到峰值，血液中的氯氰菊酯及其代謝物在7-8小時(shí)達(dá)到峰值。
　　氯氰菊酯藥物原體及其代謝物在血液、尿液、膽汁中的藥物動(dòng)力學(xué)均符合一級(jí)吸收藥物動(dòng)力學(xué)模型，氯氰菊酯藥物原體在血液、尿液、膽汁中的吸收半衰期分別為1.66±1.92h、0.70±0.47h和0.43±0.23h，消除

6、半衰期分別為5.84±4.26h、7.99±6.51h和3.93±0.71h；其代謝物3-PBA在尿液、膽汁中吸收半衰期分別為0.27±0.27h和0.64±0.07h，在血液、尿液、膽汁消除半衰期分別為5.33±2.81h、1.17±0.78h和1.36±0.11h；其代謝物DCVA在血液、尿液、膽汁中吸收半衰期分別為4.29±1.60h、0.12±0.09h和0.50±0.28h，消除半衰期分別為5.25±2.38h、1.99±1.

7、12h和3.36±1.50h。
　　3.服藥時(shí)間的推斷：采用一個(gè)時(shí)間點(diǎn)的毒物原體和代謝物濃度比值與服藥時(shí)間擬合，建立了一種推算氯氰菊酯服藥時(shí)間的回歸方程，絕大多數(shù)推算值與實(shí)際服藥時(shí)間的誤差小于20%。
　　結(jié)論：
　　1.本實(shí)驗(yàn)建立了氯氰菊酯及其代謝物的毒物代謝動(dòng)力學(xué)研究模型，氯氰菊酯毒物原體在血液和尿液中藥物動(dòng)力學(xué)符合一級(jí)吸收二室開(kāi)放模型，在膽汁中符合一級(jí)吸收一室開(kāi)放模型；代謝物3-PBA在血液和尿液中藥物動(dòng)力學(xué)符合