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1、目的:本課題針對(duì)目前紅芪產(chǎn)量低、種植面積及市場(chǎng)流通量急劇下降、缺乏規(guī)范化栽培技術(shù)及系統(tǒng)的質(zhì)量綜合評(píng)價(jià)體系等問(wèn)題,以甘肅地產(chǎn)特色藥材紅芪為研究對(duì)象,緊密結(jié)合生藥學(xué)、中藥化學(xué)及生態(tài)學(xué)等學(xué)科的研究方法,采用顯微成像、HPLC、紫外-可見(jiàn)分光光度法、火焰光度法等現(xiàn)代分析技術(shù),對(duì)紅芪藥材進(jìn)行基源、性狀、顯微、TLC鑒別和水分、總灰分、酸不溶性灰分、醇溶性浸出物檢查,為紅芪的定性鑒別和常規(guī)檢查提供依據(jù)。確立紅芪的質(zhì)量控制指標(biāo),對(duì)不同產(chǎn)地紅芪質(zhì)量進(jìn)行
2、分析研究,建立不同產(chǎn)地紅芪藥材的指紋圖譜,為建立系統(tǒng)、全面、規(guī)范化的質(zhì)量評(píng)價(jià)體系提供有效的研究支撐。同時(shí),通過(guò)探討土壤等生態(tài)環(huán)境因素對(duì)其質(zhì)量的影響,對(duì)其產(chǎn)地適宜性進(jìn)行分析,為紅芪的最佳栽培區(qū)域選擇提供參考依據(jù)。
方法:本課題通過(guò)實(shí)地調(diào)研,收集資料,采集試驗(yàn)樣本136份,其中藥材樣本70份,土壤樣本66份。對(duì)所采集的藥材樣品進(jìn)行性狀、組織特征、粉末特征、薄層色譜鑒別,且依照《中國(guó)藥典》(2010版)附錄中所載水分測(cè)定方法-烘干法
3、、灰分測(cè)定法、浸出物測(cè)定方法–熱浸法對(duì)紅芪樣品進(jìn)行水分、總灰分、酸不溶性灰分、醇溶性浸出物測(cè)定;采用高效液相色譜法、紫外-可見(jiàn)分光光度法,分別建立異黃酮類(lèi)成分(芒柄花素和毛蕊異黃酮)和多糖含量測(cè)定方法,并對(duì)不同產(chǎn)地紅芪藥材中芒柄花素、毛蕊異黃酮和多糖含量進(jìn)行測(cè)定,分析不同產(chǎn)地栽培與野生紅芪中活性成分含量的差異性;同時(shí),利用高效液相色譜法建立不同產(chǎn)地紅芪藥材的指紋圖譜。對(duì)所采集的土壤樣品,采用凱氏定氮法、火焰光度法、紫外-可見(jiàn)分光光度法及
4、重鉻酸鉀容量法測(cè)定其中所含養(yǎng)分全氮、全鉀和速效鉀、全磷和速效磷及有機(jī)質(zhì)的含量,并通過(guò)聚類(lèi)分析、因子分析、相關(guān)性分析等分析方法,對(duì)所測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
結(jié)果:70份紅芪藥材樣品的定性鑒別和常規(guī)檢查結(jié)果表明,除部分藥材總灰分和浸出物含量不符合藥典規(guī)定外,其余各樣品的各項(xiàng)檢查均符合藥典規(guī)定。通過(guò)方差分析發(fā)現(xiàn),不同產(chǎn)地栽培與野生紅芪中主要活性成分含量間存在一定的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,其中采自武都地區(qū)的紅芪樣品中浸出物、毛蕊異黃酮、芒柄花素及
5、總多糖含量均高于宕昌、定西地區(qū)所采樣品,栽培紅芪中除浸出物含量較野生紅芪高外,其余各活性成分均低于野生品。采用高效液相色譜法所建立的不同產(chǎn)地紅芪藥材的指紋圖譜經(jīng)聚類(lèi)分析和相似度評(píng)價(jià)分析,結(jié)果表明不同產(chǎn)地栽培與野生紅芪樣品間化學(xué)成分存在一定差異。其中武都產(chǎn)紅芪主要成分與定西產(chǎn)紅芪之間差異較大,宕昌產(chǎn)紅芪介于兩者之間。而栽培與野生紅芪樣品間差異較小。
通過(guò)比較37批土壤樣品中營(yíng)養(yǎng)成分含量,結(jié)果各樣品間差異明顯。不同產(chǎn)地紅芪根際土壤
6、樣品間全氮、全鉀含量存在一定差異,其中武都組全氮含量明顯低于宕昌組。不同生長(zhǎng)方式、不同土壤類(lèi)型樣品間全磷含量均存在差異,其中栽培組全磷含量高于野生組,黃土組全磷含量高于紅土組。
通過(guò)因子分析對(duì)紅芪中活性成分含量與生態(tài)因子的相關(guān)性進(jìn)行了研究。研究結(jié)果表明生態(tài)因子中熱量、地理、光照、降雨量是影響紅芪質(zhì)量的關(guān)鍵性因子。其中≥10℃積溫是影響紅芪多糖的最顯著變量,緯度因子是影響紅芪中芒柄花素和毛蕊異黃酮含量的最顯著變量,年輻射量是影響
7、紅芪中浸出物含量的最顯著變量。
土壤營(yíng)養(yǎng)成分與中藥紅芪中活性成分含量之間的相關(guān)性分析和回歸分析結(jié)果表明,影響紅芪中毛蕊異黃酮和芒柄花素含量的主要土壤營(yíng)養(yǎng)成分為全磷;影響紅芪中總多糖含量的主要土壤營(yíng)養(yǎng)成分為全氮;影響紅芪中浸出物含量的主要土壤營(yíng)養(yǎng)成分為全磷和有機(jī)質(zhì),其中有機(jī)質(zhì)含量與浸出物含量呈負(fù)相關(guān)。
結(jié)論:不同產(chǎn)地野生與栽培紅芪的質(zhì)量存在明顯差異,其中野生紅芪質(zhì)量?jī)?yōu)于栽培紅芪,武都地區(qū)紅芪藥材質(zhì)量?jī)?yōu)于宕昌、定西地區(qū)所
8、產(chǎn)紅芪,這進(jìn)一步詮釋了道地藥材“米倉(cāng)紅芪”的內(nèi)在涵義。
不同生態(tài)因子對(duì)紅芪中活性成分含量的影響存在差異,其中熱量、地理、光照、降雨量是影響紅芪質(zhì)量的關(guān)鍵性因子,且導(dǎo)致紅芪中活性成分含量差異的原因是各生態(tài)因子的綜合作用,而不是個(gè)別生態(tài)因子的變化。
土壤營(yíng)養(yǎng)成分是植物生長(zhǎng)過(guò)程中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的主要來(lái)源,是影響紅芪活性成分含量的關(guān)鍵環(huán)境因子。紅芪對(duì)土壤中不同營(yíng)養(yǎng)成分具有選擇性,土壤營(yíng)養(yǎng)成分含量的變化對(duì)紅芪植物活性成分的形成與積累
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